植物转基因载体

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从孟德尔定律的发现,一百多年来人们对基因的认识在不断深化。1866年,奥地利学者G.J.孟德尔在他的豌豆杂交实验中,用大写字母A、B等代表显性性状如圆粒、子叶黄色等,用小写字母a、b等代表隐性性状如皱粒、子叶绿色等。他并没有严格地区分所观察到的性状和控制这些性状的遗传因子。但是从他用这些符号所表示的杂交结果来看,这些符号正是在形式上代表着基因,而且至今在遗传学的分析中为了方便起见仍沿用它们来代表基因。



腺病毒载体应用优势

腺病毒载体转0基因效率较高,体外实验通常接近100%的转导效率;可转导不同类型的人组织细胞,不受靶1细胞是否为分裂细胞所限;容易制得高滴度病毒载体,在细胞培养物中重组病毒滴度可达(10E+11)/ml;进入细胞内并不整合到宿主细胞基因组,仅瞬间表达,植物载体,性高。因而,腺病毒载体在基因治1疗临床试验方面有了越来越多的应用,成为继逆转录病毒载体之后广泛应用且非常具前景的病毒载体。



腺病毒(adenovirus)是一种没有包膜的直径为70~90 nm的颗粒,由252个壳粒呈廿面体排列构成。每个壳粒的直径为7~9 nm。衣壳里是线状双链DNA分子,约含4.7kb,两端各有长约100 bp的反向重复序列。由于每条DNA链的5'端同相对分子质量为55X103Da的蛋白质分子共价结合,可以出现双链DNA的环状结构。

人体腺病毒已知有52种,分别命名为adl~ad52,研究得详细是ad2。腺病毒基因组转录产生mRNA,已知的转录单位至少有5个:EⅠ区位于病毒基因组左侧,可再分成EⅠA和EⅠB,与细胞转化有关;EⅡ区编码DNA结合蛋白,参与病毒的copy;EⅢ区编码出现在宿主细胞表面的一种糖蛋白;EⅣ区位于ad2基因组右端,受EⅡ区编码的DNA结合蛋白质调控;第5个转录单位在病毒感1染中期合成ad2蛋白质Ⅳ。



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