RobustScriptIII反转录酶

概述：

 RobustScript III反转录酶是基因工程改造后的M-MLV反转录酶(莫洛尼氏鼠白血病病毒pol基因)，降低了RNA酶H活性，增强了热稳定性。由于RobustScript III反转录酶可以在高至55°C下合成cDNA第一链，从而能得到比其它的反转录酶特异性更好、产量更高的cDNA，并且更多的全长cDNA。RobustScript III反转录酶可合成从100 bp到12 Kb以上的cDNA。

 反应条件：

 5 × 反应缓冲液 ：250 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25°C)，375 mM KCl，15 mM MgCl₂

 质量检测:

 核酸外切酶活性：50 μl反应体系中，500 U本酶与1 μg的pUC19质粒于37°C温育4小时，电泳条带无明显变化。
核酸内切酶活性：50 μl反应体系中，2000 U本酶与1 μg的Hind III消化的λDNA于37°C温育4小时，电泳条带无明显变化。
RNase活性：25 μl反应体系中，1000 U本酶与250 ng的大肠杆菌rRNA于37°C温育2小时，经琼脂糖电泳检测，被降解的rRNA小于1%。
纯度：经SDS-PAGE (考马斯亮蓝染色) 检测其纯度大于90%。

 质保声明：

 RobustScript III反转录酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

 单位定义：

 1单位指以poly(A)为模板，oligo(dT)25为引物，在37°C反应10分钟可以将1 nmole的dTTP掺入酸不溶物中的酶量。

 参考文献:

 1. Kotewicz M.L., D‘Alessio J.M., Driftmier K.M., Blodgett K.P., and Gerard G.F. (1985) Gene 35, 249.
2. Gerard G.F., D‘Alessio J.M., Kotewicz M.L., and Noon M.C. (1986) DNA 5, 271.
3. Houts G.E., Miyagi M., Ellis C., Beard A., and Beard J.W. (1979) J. Virol. 29, 517.