TaqDNA聚合酶

概述：

 Taq DNA聚合酶是一种耐热聚合酶，该酶具有5?→3?聚合酶活性和双链特异性5?→3?核酸外切酶活性^(1,2,3)。该酶是PCR中应用最广泛的酶。为了便于各种PCR反应，标准Taq缓冲液不含有非离子变性剂，适用于要求无变性剂的反应的需要^(4,5)。

 来源：

 来源于一种E.coli菌株，此菌株含有来源于Thermus aquaticus YT-1的Taq DNA聚合酶基因。

 应用：

 1. 常规PCR。
2. 微阵列分析。
3. 高通量PCR。
4. DHPLC。
5. 菌落PCR。

 反应条件：

 100 ?l的反应体系含：1× 标准Taq反应缓冲液 [10 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25 °C)，50 mM KCl，1.5 mM MgCl₂]，DNA模板，引物，200 ?M dNTPs和2-5 U的聚合酶。

 质量检测:

 5 kb Lambda PCR：以5 ng Lambda DNA为模板，在1× 标准Taq反应缓冲液中加入200 ?M dNTPs、0.2 ?M引物和2.5 U的聚合酶进行PCR扩增25个循环，获得5 kb特异性产物100 ng。
核酸内切酶活性：50 ?l反应体系中，20 U本酶与1 ?g的pUC19质粒于37°C下温育4小时，DNA的电泳条带无明显变化。 

 质保声明：

 Taq DNA聚合酶 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

 单位定义：

 1单位指75°C条件下反应30分钟，能使10 nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。

 参考文献:

 1. Mattlia, P. et al. (1991) Nucl. Acids Res., 19, 4967-4973.
2. Eckert, K.A. and Kunkel, T.A. (1991) PCR Methods and Applications, 1, 17-24.
3. Kong, H.M. et al. (1993) J. Biol. Chem., 268, 1965-1975.
4. Perler, F. et al. (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89, 5577-5581.