一种酶解膜分离制备免疫活性大豆肽

种酶解和膜分离制备免疫活性大豆肽的方法，属于大豆蛋白深加工技术领域。本发明以脱脂大豆蛋白粉为原料，首先对其进行酸洗得到酸洗大豆蛋白，然后使用Alcalase蛋白酶在一定条件下进行酶水解得到粗大豆肽液；再采用微滤对所制备得到的粗大豆肽液进行澄清处理；然后采用超滤和纳滤进行富集和脱盐处理；最后通过干燥得到粉状的免疫活性大豆肽。采用中性红吞噬试验和淋巴细胞增殖法测定大豆肽活性表明，制备所得的大豆肽具有良好的免疫活性。?
一种酶解和膜分离制备免疫活性大豆肽的方法，其特征在于所述方法步骤为：（1）对脱脂大豆蛋白粉进行酸洗得到酸洗大豆蛋白：以脱脂大豆蛋白粉为原料，按g/mL?为1:10~1:20加酸洗液，酸洗液采用质量浓度2g/L?的Na2SO3水溶液，调节pH4.0~5.0，温度50~60℃，洗涤时间10~20min，酸洗2~4次，酸洗后离心除去上清液，得到酸洗大豆蛋白；（2）使用Alcalase蛋白酶在一定条件下进行酶水解得到粗大豆肽液：将步骤（1）所得的酸洗大豆蛋白，按g/mL?为1:10~1:20加水，调节pH至8.0，调至pH8.0过程中，蛋白粘度逐渐增大，要搅匀，调节温度为55~65℃，添加Alcalase蛋白酶，E/S=1.0%~3.0%，反应过程中保持pH值恒定，当水解度DH=20%时，调节pH至4.0灭酶，3000r/min离心15min，所得上清液即为粗大豆肽液；（3）采用微滤、超滤和纳滤对所制备得到的粗大豆肽液进行澄清、富集、脱盐处理；采用微滤对所制备得到的粗大豆肽液进行澄清除杂处理：在室温下对大豆肽液进行全回流微滤操作，采用的微滤膜为孔径0.10~0.45μm的聚砜膜；在处理过程中，微滤以180min为一个运行周期，收集得到澄清透明的粗大豆肽液；运行周期结束后停机进行膜组件的清洗和再生；采用超滤对微滤后的粗大豆肽液进行富集处理：在室温下对微滤后的粗大豆肽液进行全回流超滤操作，采用的超滤膜的截留分子量MWCO为5000~8000，料液的大豆肽初始浓度为6.0%~8.0%，pH为4.0，压力在0.35～0.8MPa之间，收集滤出液，实现对活性大豆肽液的富集；采用纳滤对超滤后的粗大豆肽液进行脱盐处理：在室温下对超滤后的粗大豆肽液进行全回流纳滤操作，采用的纳滤膜的截留分子量MWCO为150~300，操作pH为4.0，压力在0.4~0.7MPa之间，收集滤出液；（4）对纳滤后收集的滤出液通过喷雾干燥得到粉状的免疫活性大豆肽；（5）采用吞噬中性红试验或淋巴细胞增殖法测定大豆肽活性，表明制备所得的大豆肽具有良好的免疫活性。