厂商 ：至善（北京）健康医学研究院
北京市 北京市- 主营产品：
- 转基因小鼠模型建立
- 小鼠骨髓间充质干细胞
- 大鼠骨髓间充质干细胞
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商品详细描述
| 荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，是一种具有革命意义的定量PCR技术。其原理是在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来实时测定特异性产物的量，并据此推断目的基因的初始量。由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，已成为国际公认的核酸分子定量的标准方法，目前在基因表达研究和临床疾病检测等领域已得到广泛应用；另外，荧光定量PCR技术正以无可比拟的优势取代Northern杂交成为mRNA定量的金标准。目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化；比较不同组织的mRNA表达差异；验证基因芯片，siRNA干扰的实验结果。 医科利昊生物为您提供全套实时荧光定量PCR服务，您只需准备好样品，其余全部由我们来为您完成。有染料法（SYBR Green）和探针法（Taqman、分子信标等）两种实验方法可供选择。实验中所用试剂全部为进口名牌产品，确保为您提供精确的检测数据，获得相关生物学研究结果。 我们为客户提供的DNA 或RNA 的实时荧光定量PCR服务分为3类： 1. 定性分析：病毒和病原菌检测、生物品种鉴定、SNP解析等；2. 绝对定量：病毒和病原菌定量分析、导入基因拷贝数解析、GMO定量解析等；3. 相对定量：基因芯片结果验证、mRNA表达量分析、miRNA效果验证等。 主要服务内容包括： 1. 引物、探针设计与合成：根据基因序列设计并合成特异性Real-time PCR引物和探针。2. RNA抽提：（1）组织样品：取100mg组织样品加入1ml Trizol，匀浆后抽提RNA。（2）细胞样品：取1×107个细胞，PBS洗涤三次，去PBS后加入1ml Trizol，裂解后抽提RNA。3. RNA质量检测：（1）测定RNA在260nm和280nm波长处的吸收值，以计算其浓度并评估纯度。（2）变性琼脂糖凝胶电泳，检测RNA纯度及完整性。4. 逆转录：使用逆转录酶（RNase H-）将样品RNA逆转录为cDNA。5. 标准曲线制备：将标准品质粒做梯度稀释后，进行real-time PCR扩增和检测，以Ct值对拷贝数绘制标准曲线。6. 定量PCR反应：将待测样品加入优化过的real-time PCR反应液中，进行real-time PCR扩增，检测目的基因和内参基因的Ct值。每反应均做3个平行复孔。7. 数据分析：（1）相对定量：使用△Ct法计算目的基因在不同组间的表达差异。（2）绝对定量：将样品的Ct值代入标准曲线，以对目的基因进行定量。（3）熔解曲线分析：确定产物特异性。8. 实验报告：（1）样品质检报告；（2）实验设计报告；（3）定量结果报告（扩增反应、溶解曲线、定量数据结果及其柱状图 、统计学差异分析结果）。 您需提供： 1. 新鲜的、且尽量多的组织样品或细胞样品（> 5 ug/ 样品），干冰保存。2. 背景资料：目的基因全长基因序列或Gene ID、样品来源和mRNA丰度等。 样品量要求： 1、组织：200-400mg 2、细胞：约107细胞 3、mRNA：200-400ng 详情请致电：010-51667988。欢迎预约上门取样。友情提示：基因表达具有一定的时间性，在进行样本之间基因表达研究时，选择合适的时间取样对获得理想的实验结果起着决定性的作用，真核生物基因表达高峰期一般在蛋白理化指标高峰期的前一阶段，请适时选取 |
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