厂商 :至善(北京)健康医学研究院
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- 转基因小鼠模型建立
- 小鼠骨髓间充质干细胞
- 大鼠骨髓间充质干细胞
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基因敲除小鼠技术服务,一对同源染色体上相同的等位基因都被失活基因取代。通常先利用同源重组的方法“修饰”一个等位基因,得到嵌合体小鼠;接着通过两代或多代的选择育种,选择出等位基因完全被“修饰”而失活的纯合小鼠。基因敲除小鼠使得研究者们能够观察到某一特定基因完全失活后小鼠表型的改变,从而推断出特定基因的作用。 基因敲除小鼠技术服务第一步,胚泡时期发育胚胎的分离。此胚胎来源于灰色品系的小鼠。 基因敲除小鼠技术服务第二步,从灰色小鼠胚泡中分离胚胎干细胞,在体外进行培养。 基因敲除小鼠技术服务第三步,用同源重组载体转染胚胎干细胞,用含有新霉素和更昔韦洛的培养基筛选发生了同源重组的细胞。 基因敲除小鼠技术服务第四步,将筛选得到的胚胎干细胞植入白色小鼠的早期胚胎(胚泡时期)中。 基因敲除小鼠技术服务第五步,将上述胚胎植入假孕母鼠(白色)子宫中。 基因敲除小鼠技术服务第六步,在母鼠所产的小鼠中,有一些是正常的白色,另一些则是嵌合体灰白相间的小鼠。这些嵌合体小鼠的细胞一部分起源于白色皮毛的胚泡细胞,另一部分则起源于重组的胚胎干细胞。起源于重组胚胎干细胞的皮毛显示出灰色斑块,很好辨认。 基因敲除小鼠技术服务第七步,嵌合体小鼠与野生型白色小鼠进行杂交,如果嵌合体小鼠的生殖细胞恰好是起源于重组胚胎干细胞,那么其子代小鼠就都应该呈现灰色。而这些灰色小鼠的所有细胞都是杂合体。 基因敲除小鼠技术服务第八步,杂合体灰色小鼠(+/H)之间进行杂交,得到灰色和白色的子代。从灰色子代中筛选出纯合小鼠(H/H),其一对同源染色体上的等位基因都失活,此纯合小鼠即为 “基因敲除小鼠”。 们有开发的基因敲除小鼠APOE(动脉硬化研究),
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