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- 转基因小鼠模型建立
- 小鼠骨髓间充质干细胞
- 大鼠骨髓间充质干细胞
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??????基因敲除小鼠是利用基因打靶技术产生转基因动物的程序，基因敲除小鼠程序一般为：(1)?构建基因打靶载体; (2)?将基因打靶载体通过一定的方式(常用电穿孔法)?导入同源的胚胎干细胞中，使外源DNA?与胚胎干细胞基因组中相应部分发生同源重组,将打靶载体中的DNA?序列整合到内源基因组中从而得以表达; (3)?筛选发生同源重组的阳性克隆，基因敲除小鼠构建通过显微注射或者胚胎凝集的方法将经过遗传修饰的ES细胞引入受体胚胎内制作嵌合体小鼠，在生物活体中研究特定基因的功能。基因敲除小鼠使得研究者们能够观察到某一特定基因完全失活后小鼠表型的改变，从而推断出特定基因的作用。基因敲除小鼠基因打靶的原则是, 外源DNA 片段含有与目的基因的某一段核酸序列相同或接近的同源序列, 同源重组就发生在这两个序列之间。外源DNA 序列的定位整合有两种方式, 即插入型(又称O 型) 和置换型(又称8 型)。与此相对应,?基因敲除小鼠打靶载体可分为两类: 插入型载体和置换型载体
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??????基因敲除小鼠是利用基因打靶技术产生转基因动物的程序，基因敲除小鼠程序一般为：(1)?构建基因打靶载体; (2)?将基因打靶载体通过一定的方式(常用电穿孔法)?导入同源的胚胎干细胞中，使外源DNA?与胚胎干细胞基因组中相应部分发生同源重组,将打靶载体中的DNA?序列整合到内源基因组中从而得以表达; (3)?筛选发生同源重组的阳性克隆，基因敲除小鼠构建通过显微注射或者胚胎凝集的方法将经过遗传修饰的ES细胞引入受体胚胎内制作嵌合体小鼠，在生物活体中研究特定基因的功能。基因敲除小鼠使得研究者们能够观察到某一特定基因完全失活后小鼠表型的改变，从而推断出特定基因的作用。基因敲除小鼠基因打靶的原则是, 外源DNA 片段含有与目的基因的某一段核酸序列相同或接近的同源序列, 同源重组就发生在这两个序列之间。外源DNA 序列的定位整合有两种方式, 即插入型(又称O 型) 和置换型(又称8 型)。与此相对应,?基因敲除小鼠打靶载体可分为两类: 插入型载体和置换型载体
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