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使用血清细胞培养的操作技巧

1.保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃时，请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶，建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。

2.将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，快速转膜液电话，然后在室温下使之全融。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。

3.一旦在新鲜培养基中添加了血清和抗生su时，应该在两到三周内使用它。因为一些抗生su和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。

4.解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。

   一般客户拿到细胞后，应该注意什么？

   客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞 100X，200X 各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。 收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，快速转膜液多少钱，未超过 80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下 10ml 培养液继续培养；超过 80%汇合度时，快速转膜液费用，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000 转/分钟离心 2 分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

    细胞培养在实验过程中污染的原因:1、真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。2、病毒：组织细胞培养过程中，如果没有除去潜在的病毒，龙岩快速转膜液，就会产生病毒污染。目前，从原代猴shen细胞的培养中已发现不少于20种血清性bing毒。尽管病毒污染的细胞不影响原代培养，但生产yi苗是不安全的。因此，潜在病毒是细胞大量生产和yi苗、干扰素等生物制品制作中的难题。


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