桑黄栽培深加工工艺专利

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01、“桑黄”的鉴定、人工培养及优良菌株的选育

对“桑黄”来源菌之一鲍氏针层孔菌Phellinusbaumii的鉴定、人工培养及优良菌株的选育进行了研究。针对“桑黄”基原物种混乱以及在“桑黄”的应用中,“同名异物”和“同物异名”现象频频发生的状况,通过查阅大量的古代和现代文献,对“桑黄”的基原物种进行探讨,同时采用形态特征、基于ITS序列的分子鉴定相结合的方法对7个不同来源的“桑黄”菌株进行鉴定,结果表明在7个被称为“桑黄”菌株中,分别来自同属的三个不同物种,其中编号为SA01的菌株为Plinteus,编号为SA02、SA05、SA06、SA07的四个菌株为Pbaumii,编号为SA03、SA04的菌株为Pgilvus。物种的明晰,为下一步的工作打下了基础。目前“桑黄”的野生资源短缺,但“桑黄”的市场需求量却在加大,因此在本文..............共46页

02、桑黄的生物学特性及其发酵培养条件的优化

以4个不同产地的桑黄菌株为研究对象,分别对桑黄固体培养基及其培养条件的优化、桑黄液体培养基及其培养条件的优化及桑黄液体深层发酵培养进行了较深入的研究,主要研究结果如下:1.桑黄固体培养基及培养条件的优化试验研究了不同的母种菌龄、碳源、氮源、碳氮源浓度组合、微量元素及其浓度组合和温度对桑黄菌丝生长量的影响。结果表明:在母种平皿上半径3cm处打菌碟接种时,4个桑黄菌株的菌丝生长量均达到最大值;菌丝生长最适合的碳源、氮源及其浓度组合为:葡萄糖3%、蛋白胨4%;微量元素及其浓度组合为:磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁O.1%、硫酸铜0.2%、复合维生素B0.05%、维生素EO.05%;最适培养温度为25℃。2桑黄液体培养基及培养条件的优化试验在考察了桑黄液体培养的菌丝体..............共55页

03、桑黄多酚的提取及其体外抗氧化、抗肿瘤活性研究

桑黄多酚的超声提取过程中乙醇浓度、超声时间、超声温度、料液比对多酚得率影响较大。在单因素的基础上依据中心法则采用响应面设计优化得到桑黄多酚的超声提取最优工艺为:以60%乙醇为提取溶剂,超声提取时间27mIn,超声提取温度50℃,料液比L:25,在此条件下桑黄多酚提取率可达28.6mG。桑黄多酚有较强的清除DPPH及OH自由基的能力、有较强的Fe3+还原能力及较强的还原力。桑黄酚类化合物明显抑制人肺癌细胞株A549的增殖,48H时对人肺癌A549细胞株的IC50为73.31.tG’mL一,并可诱导肿瘤细胞凋亡及明显的降低线粒体膜电位。结论采用超声辅助提取桑黄多酚,时间短、得率高,是一种高效、快捷的方法。桑黄多酚有较强的清除DPPH自由基及‘OH自由基的能力、有较强的Fe3..............共60页

04、桑黄多糖类成分及制剂研究

以桑黄子实体为原料,研究桑黄多糖的提取工艺、水提粗多糖的降糖活性和调节血脂的功能以及桑黄多糖分散片的制备和质量控制,为桑黄的开发利用提供依据,主要研究内容和结果如下:1.桑黄粗多糖的提取工艺和含量测定研究。根据单因素和正交试验,对桑黄多糖得率影响的主次顺序为:温度>时间>料液比。最佳提取工艺条件为料液比1:20、温度100℃、时间3H、提取3次,该工艺条件下多糖的得率为5.52%,多糖含量为48.96%。2.桑黄多糖的降糖活性研究。采用地塞米松诱导3T3.L1前脂肪细胞分化获得脂肪细胞,用此模型研究桑黄多糖体外降糖活性。桑黄多糖对上述细胞模型DmEm高糖培养基中的葡萄糖消耗有促进作用,桑黄多糖高、中、低剂量组培养基中葡萄糖的消耗量分别为6.76mmOL..............共44页

05、桑黄多糖提取、分离纯化及理化性质研究

对桑黄多糖的提取、分离纯化、理化性质及菌丝体深层发酵进行了研究,建立了桑黄多糖分离纯化的技术路线,并对不同来源桑黄的粗多糖含量和蛋白质含量等进行了比较。将桑黄多糖依次采用乙醇分级醇沉、超滤、离子交换层析和凝胶过滤等分离纯化方法得到一个均一组分PBF1-A。分级醇沉将桑黄多糖初步分为两个部分PBF1和PBF2,得率分别为43%和49%;然后对PBF1进行超滤,多糖纯度达到76%,回收率为86%;将超滤后的滞留液采用离子交换层析,然后脱盐、浓缩,再经凝胶过滤得到均一组分PBF1-A。桑黄多糖均一组分PBF1-A极易溶于水,是一种蛋白糖,其多糖含量为96.6(±0.5)%,蛋白质含量为3.04(±0.05)%,比旋度为-4.6°,分子量大于2000KDa;用三氟乙酸对PBF1-A进行完全酸水解,可..............共53页

06、桑黄多糖提取纯化及活性研究

桑黄是已知生物抗癌领域功效显著的大型真菌之一,由于过度开采,桑黄野生资源匮乏,人工栽培技术尚不成熟,使其成为研究和开发热点。桑黄主要功效成分是多糖,多存在于子实体中,菌丝体中也有一定含量。目前关于桑黄的文献报道主要集中在多糖提取、抗癌机理及分子结构研究。但桑黄人工栽培还处于实验室阶段,对于多糖抗癌活性的具体物质组成仍在研究中,有关不同菌种桑黄多糖的差异性研究尚不清楚。本文选用日本桑黄和韩国桑黄两个菌种,采用袋料栽培与液体菌丝发酵法培养子实体与菌丝体,通过单因素和正交试验优化提取和检测方法,并采用离子交换柱层析法纯化其多糖成分,在此基础上进行肝癌HePG.2细胞体外抑瘤试验,以探讨不同菌种不同纯度桑黄多糖的含糖量与抗癌..............共50页

07、桑黄发酵过程优化及其多糖代谢调控研究

为了深入研究桑黄深层发酵过程中菌丝生长和胞外多糖合成的机理,为工业化大规模生产奠定基础。本文对桑黄菌丝发酵过程进行了优化,得到了大量生长良好,菌球松散的种子液和有利于桑黄菌丝体生长和胞外多糖合成的全合成培养基。筛选了对菌丝生长和胞外多糖合成有调控作用的碳源和植物激素,并从发酵动力学、菌丝体形态、氨基酸含量变化、多糖结构四个角度,分析了碳源和植物激素对桑黄胞外多糖合成代谢的调控机制。同时利用响应面优化了桑黄菌丝多糖提取工艺,并对胞外多糖结构进行了分析。最后以高脂饲料构建的高脂血症大鼠为实验对象,对发酵法生产的桑黄菌丝胞内、胞外多糖进行了降血脂活性分析。主要结果如下:1.通过桑黄种子液和全合成培养基筛选,优化了菌丝发酵过程种子液..............共48页

08、桑黄黄酮的提取制备与生物活性初步研究

利用硅胶柱分离纯化桑黄黄酮的实验中,在5个洗脱梯度组分中得到24个分离样品,发现桑黄中有59种黄酮类化合物。在用大孔树脂提取分离桑黄黄酮的实验中,查阅了相关的吸附动力模型后提出理想球体吸附平衡模型,同时用工程数学方法推导出理想球体吸附平衡方程吸附动力模型,并用实验初步验证。在桑黄黄酮的生理活性应用实验中,本文对比相同质量的BHA标准品、桑黄黄酮提取物总黄酮含量为:41%、Vc标准品的抗氧化能力,发现相同质量的桑黄提取物总黄酮含量为:41%的抗氧化能力与BHA标准品相当,强于Vc标准品的抗氧化能力,证明了桑黄黄酮有着十分理想的抗氧化能力和十分理想的应用前景,为我国深层次开发桑黄资源提供了有利的支持。本文实验结果总结如下。1提取方法的确定..............共60页

09、桑黄菌不同培养方法的抗癌活性研究

桑黄是己知生物抗癌领域有效率最高的大型真菌,近年来由于过度开采,桑黄野生资源匮乏,人工培养技术尚不成熟,使其成为真菌类药物研究和开发的热点。目前关于桑黄的文献资料报道主要集中在人工培养、抗癌机理及功能成分的研究。但人工培养还处于实验室阶段,抗癌机理和有效成分的研究尚不清楚。本文选用日本桑黄和韩国桑黄两个菌种,采用固体发酵法培养菌丝体和子实体,通过单因素和正交试验确定液体培养条件进行液体纯菌丝的培养。利用水提醇沉法提取固体菌质、子实体和菌丝中的多糖。以环磷酰胺抗肿瘤药物为对照,建立小鼠SL80肿瘤移植模型,对不同培养条件下提取得桑黄多糖进行抑瘤效果的评价。利用薄层层析和岛津GC.14B气相色谱进行单糖组成分析。试验结果显..............共50页

10、桑黄菌生物学特性研究

以开发利用桑黄这一新兴的药用菌物资源,探明其菌丝体生长所需条件环境条件、营养条件和测定几种胞外酶活性为目的,对桑黄的主要生物学特性进行测定,以正交试验确定了桑黄菌丝体生长所需的最适培养基,为桑黄的活性成分研究、开发新药及人工栽培桑黄子实体提供了科学依据;通过DNA测序技术等技术,确定三种桑黄菌种为火木层孔菌。主要结果如下:1.环境条件对桑黄菌丝体的影响桑黄菌丝体能在10-34℃的温度条件下生长,菌丝体最适生长温度为28℃。3-5℃为菌种保藏最适温度。在桑黄菌丝体生长过程中,给与适量的光照能促进菌丝体生长,但形成菌落比较稀疏,颜色较淡,呈绒毛状,而在黑暗条件下形成的菌落,菌丝浓密,颜色较深;当光照大于600Lx,光照抑制菌丝生长。桑黄..............共44页

11、桑黄菌子实体发育条件的研究

通过人工培养观察及生理生化分析,总结桑黄菌菌丝生长、子实体分化发育的规律,为桑黄菌子实体商品化生产提供科学依据。实验通过聚丙烯酰胺酯酶同工酶凝胶电泳、拮抗试验和菌丝培养观察对4个常见桑黄菌株进行了种性分析。结果表明:酯酶同工酶电泳共检出22条谱带,其中迁移率不同的谱带16条,在Rf0.13~0.89之间。日本桑黄菌株、华中桑黄菌株与山东桑黄菌株和韩国桑黄菌株之间的酶谱差异明显联合系数在0.250-0.333之间;山东桑黄菌株和韩国桑黄菌株的酯酶同工酶谱相似联合系数接近于1.酯酶同工酶分析结果与拮抗试验和菌丝培养观察结果一致。菌丝培养基优化试验结果表明,桑黄一级种最适合的碳源为葡萄糖,其次是红糖,蔗糖最差。氮源用综合PDA培养基不必再另外添加。豆汁培养基有抗菌丝衰老和抗褐变的能力。桑黄菌二级种适合的碳源为棉籽壳,其次为棉籽壳与木屑掺半,纯木屑最差..............共46页

12、桑黄抗氧化活性成分的筛选及基分离纯化

对不同品种、不同培养方式得到的桑黄原料中的抗氧化活性成分进行了筛选、分离、纯化及体外抗肿瘤和修复神经细胞的生物活性研究。本论文的研究结果对了解桑黄抗氧化的活性成分及开发相关产品有一定的理论参考价值。本文分四个部分,主要研究结果如下:1、比较不同品种桑黄子实体化学成分和生物活性的差异,筛选出抗氧化活性较高的品种以具有抗氧化活性的多糖和黄酮为主要指标,通过比较八种桑黄子实体多糖和黄酮含量差异及生物活性的高低,选取优良品种进行活性物质的分离纯化研究。采用水提醇沉法提取了八种不同桑黄子实体的粗多糖,测定了八种桑黄粗多糖中多糖和蛋白质含量,分析了其单糖组成和氨基酸成分,同时对八种桑黄粗多糖清除活性氧自由基和刺激淋巴细胞增殖的活性进..............共54页

13、桑黄人工培养及其菌糠水提液对植物生长的影响

主要研究了桑黄菌的生物学特性并进行了桑木屑为代料人工栽培桑黄的初步研究,另外还研究了桑黄菌菌糠水提液对植物生长的影响。结果如下:(1)桑黄菌菌丝在25℃ ̄29℃下生长较好,29℃下生长最好。菌丝生长的适宜PH范围为5.5 ̄6.5,最适PH为6.0,甘露醇为固体平板培养时的最适碳源,最佳氮源为酵母膏和蛋白胨,对有机氮源的吸收比无机氮源好。(2)通过测量菌丝产量的方法,优化桑黄菌液体发酵培养条件。发酵培养基PH为5.5 ̄6.5时菌丝产量较高,PH为6.0时菌丝量最高。最佳碳源为可溶性淀粉和葡萄糖,最佳氮源为酵母膏。最佳发酵周期为9天,菌丝产量最高。摇床培养时,培养基最佳装液量为250IILL三角瓶中装100mL培养基。(3)通过比较培养基上菌丝生长的速度和长势,确定PDA为供试..............共44页

14、桑黄水溶性多糖的分离纯化及结构的初步研究

本文对桑黄菌丝体多糖的提取分离进行了研究,建立了菌丝体多糖和发酵液多糖的纯化路线,并对其中三种水溶性多糖的理化性质进行了测定。本文采用正交试验,分别研究了热水浸提法、微波辅助法和超声波法提取桑黄菌丝体粗多糖的最优工艺,根据极差分析和实验室实际情况确定了热水浸提法的最优工艺为浸提时间3小时、浸提3次、液料比50、浸提温度90℃,多糖提取率为2.10%;微波提取法的最优工艺为微波处理15min、液料比50、提取3次,提取率为4.18%;超声提取法的最优工艺为超声30min、提取2次、液料比60、温度60℃、频率60Hz,提取率为3.02%。以多糖损失率和脱蛋白率为衡量指标,选用了3种比较常见的方法:Sevag法、三氯醋酸法及三氯醋酸和酶结合法对桑黄水溶性粗多糖..............共66页

15、桑黄提取物抗肿瘤作用的探索研究

研究桑黄提取物对小鼠S180实体瘤、H22肝癌和Lewis肺癌实体瘤的生长抑制作用,体外对人瘤细胞的直接抑制作用,对荷瘤小鼠的免疫调节机制及其对化疗药物的增效作用。方法:本研究建立了小鼠S180实体瘤、H22肝癌和Lewiss肺癌实体瘤模型,观察了桑黄提取物三个剂量组在体内抑制肿瘤生长作用,用环磷酞胺(CyeloPhos-phamide,CTX)制备正常及荷瘤小鼠的免疫抑制模型,通过体内给药和体外检测的方法,观察桑黄提取物的免疫调节作用,MTT法检测了桑黄提取物对人肿瘤细胞增殖的抑制作用。并以联合用药的方式治疗小鼠S180实体瘤,用药物相互作用动力学软件分析两药合用是否有相加作用。结果:1.桑黄低、中、高剂量,对三株肿瘤均有抑制作用。2.免疫调节方面,桑黄中、高剂量均可明显升高..............共54页

16、桑黄液体发酵和桑黄多糖提取纯化的研究

桑黄是一种具有很高药用价值及广泛应用前景的真菌,目前所知桑黄中的主要活性成分为桑黄多糖。本文对影响桑黄液体培养的理化因子进行了研究,以菌丝生物量为指标,筛选了适宜桑黄液体培养的配方和培养条件,并对桑黄菌丝体里的多糖进行了提取与分离纯化试验研究。其主要内容有:理化因子对桑黄液体发酵菌丝生物量的影响研究,桑黄多糖的提取和纯化工艺研究。不同碳源因素试验显示:在供试的6种碳源中,玉米粉为最佳碳源,而且价格便宜,适宜大规模工业化生产使用。不同氮源因素试验显示:在供试的5种氮源中,黄豆粉对菌丝生物量的影响优于其他氮源,因此选择黄豆粉为最佳氮源。无机盐及生长因子的试验显示:磷酸二氢钾、硫酸镁对菌丝的生长有促进作用。在碳源、氮源..............共55页

17、桑黄液体发酵培养条件优化和活性成分研究

共分三部分,分别研究了桑黄菌株深层发酵培养条件的优化、桑黄子实体提取物抑菌和抗氧化活性和桑黄乙酸乙酯萃取相化合物成分研究及结构鉴定,主要结果如下:1、住桑黄液体发酵时,通过对桑黄菌株发酵条件优化得到胞外黄酮、多糖和菌丝体的最适培养基为:玉米粉50g/L,酵母粉4g/L,KH2PO40.2%,MgSO4·H2O0.1%,培养温度28℃,摇床转速150r/min,初始pH为5.5,接种量10%,装液量100mL/250mL,发酵周期6天。2、桑黄子实体提取物的抗氧化和抑菌活性进行了探讨,先对桑黄乙醇提物进行浓缩、萃取,分成四个级分(石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相和水相),再测定了这四相的还原力、抗脂质过氧化以及对ABTS.+、DPPH和羟基自由基的清除能力;同时研究了对藤黄微球菌、金黄色葡萄球菌、短乳杆菌..............共51页

18、桑黄子实体多糖的分离纯化、结构鉴定及结构修饰研究

桑黄,是担子菌亚门层菌纲多孔菌目多孔菌科针层菌属的一种珍贵的药用真菌。子实体入药最佳,味微苦,能利五脏、软坚、排毒,止血、活血等。民间用以治疗“月水不调”,在日本也作利尿剂使用。文献报道,桑黄子实体多糖具有抗肿瘤、增强免疫力、抗氧化、抗诱变功能、降血糖等活性。桑黄多糖的初步结构研究已有报道,但进一步的结构及构效关系的研究却未见报道。为了寻找高活性的桑黄多糖并进行构效关系的研究,我们对桑黄子实体中的多糖进行了比较系统的提取、分离、纯化、结构鉴定和化学修饰的研究。本论文共有三个部分,分别从多糖的分离纯化、理化性质、结构分析和结构修饰进行了研究。主要结果如下:1.桑黄实体多糖分离纯化及理化性质研究桑黄子实体经95%乙醇脱脂..............共60页

19、营养条件和环境条件对桑黄生长发育的影响

桑黄是珍稀药用真菌,其子实体可入药。桑黄在生物抗癌领域被国际公认为最具抗癌功效的真菌,是国际医药界与保健品行业抗癌产品生产原料。本文研究了不同培养基、碳源、氮源、碳氮比及不同的PH值、温度、湿度、氧气、光照条件对野生桑黄——火木层孑L菌生长发育的影响,主要研究结果如下:L、营养条件对桑黄生长发育的影响研究(1)在不同培养基上,桑黄菌丝生长情况存在明显差异:桑枝麸皮培养基菌丝生长速度最快,菌丝体白色、新生区分层明显、生长茂盛、厚实浓密;在蔗糖培养基上速度最慢,菌丝发育不良,甚至生长停滞,不适宜菌丝生长。(2)在不同供试碳源中,适宜桑黄菌丝生长的最适碳源为果糖,表现为菌丝生长快,茵落完整,菌丝洁白、最浓密、健壮;以甘露醇为碳源,菌..............共44页

20、桑黄4.6302菌株菌质多糖及其制备方法
21、桑黄菌丝体制品及其生产方法和用途
22、桑黄灵芝精茶及其制备方法
23、大规模液体深层发酵生产桑黄水提取物及多糖工艺
24、桑黄人工高产栽培方法及桑黄子实体的应用
25、一种桑黄保健口服液的制备方法
26、富硒桑黄的栽培及提取桑黄硒多糖的方法
27、一种利用组合膜分离技术纯化浓缩桑黄多糖的方法
28、富硒桑黄菌菌种驯化、栽培、富集方法
29、中国野生桑黄蘑菇菌株的分离培养方法
30、桑黄白桦茸的复合提取物、其制备方法及其制剂
31、桑黄灵芝多糖液及其制备方法
32、灵芝桑黄茶及其制备方法
33、一种含有从桑黄中提取的活性物质的药物组合物、制备方法及其在制备药物中的应用
34、桑黄菌丝体活性糖蛋白及其用途和制备方法
35、桑黄多糖的提取技术
36、一种桑黄黄酮及其制备方法和用途
37、一种桑黄粗多糖的提取方法及桑黄多糖的纯化方法
38、一种用于桑黄菌液体培养的合成培养基及发酵生产桑黄多糖的方法
39、一种桑黄提取物及其制备方法
40、桑黄的菌种培养及桑黄的栽培方法
41、桑黄的人工栽培方法
42、一种利用真菌诱导子提高桑黄黄酮产量的桑黄菌丝体液体发酵方法
43、一种利用高产富硒杂交红米发酵废糟培养桑黄的方法
44、桑黄北虫草保健茶及其制备方法
45、一种从桑黄中提取抗病毒活性物质的方法
46、一种利用植物油提高桑黄液体培养菌丝量的方法
47、桑黄菌丝体培养基及采用该培养基发酵桑黄菌丝体的工艺
48、一种含有桑黄菌丝体发酵液的叶面肥及其制备方法
49、一种桑树枝条仿段木种植桑黄的方法
50、一种富集纯化桑黄中桑黄总黄酮的方法
51、包含桦褐灵芝、灵芝和桑黄提取物的用于促进造血干细胞增殖的组合物
52、桑黄新菌株及其驯化
53、含有桑黄菌丝体发酵液的花期延长剂
54、一种桑黄菌丝体的制备方法
55、桑黄菌丝的固体发酵培养基及桑黄菌丝的固体发酵培养方法
56、天然桑黄与原木赤灵芝活性物质提取物的生产方法及产品
57、一种药膳桑黄肉鸡的培育方法
58、一种药膳桑黄肉鸭的饲养方法
59、一种提高桑黄总三萜类化合物产量的方法
60、一种桑黄多糖口服脂质体药物及制备工艺
61、利用桑黄发酵生产漆酶的方法
62、桑黄袋料栽培培养基及采用该培养基栽培桑黄子实体的方法
63、一种桑白皮桑黄酮G H、桑根皮素的提取方法
64、桑黄活性多糖的制备方法
65、桑黄菌株液体发酵培养基和发酵产桑黄多糖的方法
66、桑黄中单体成分-纤孔菌素A及其制备方法和应用
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