1、北冬虫夏草液体培养条件的优化与诱变育种
北冬虫夏草的成分如虫草多糖和虫草酸,与天然冬虫夏草的含量相当,有些成分的含量甚至超过天然冬虫夏草,如虫草素的含量是天然冬虫夏草的35倍[2]。其有效活性成分虫草多糖(CMPS)被认为是非特异性免疫调节剂,可激活肌体的免疫活性细胞,为我国名贵的药用真菌。但北冬虫夏草野生资源少,极大的限制了它的应用,而人工培养可弥补此点,特别是液体发酵可使北冬虫夏草的应用成为可能。目前人工栽培获得成功并开发了系列产品,为滋补保健食品、
2、蛹虫草优良菌株筛选与高产技术研究
采集野生蛹虫草菌株12株,为了研究蛹虫草子实体和菌丝的生长条件以及筛选优良的蛹虫草菌株,实验中,通过蛹虫草生物学性状观察、蛹虫草菌丝生长条件选择、液体发酵培养条件选择以及蛹虫草主要有效成分的含量测定等实验,建立了较为完整的筛选优质蛹虫草菌株的方法。得到如下结论: 一、野生和人工蛹虫草子实体在产量和外观形态上差别较大;蛹虫草子囊壳呈瓶状,子囊孢子线形、细长平行排列在子囊壳内;每个子囊内有8个子囊孢子,子囊孢子有隔膜若干,具有拟青霉型和轮枝孢型产孢结构。 二、通过实验证明蛹虫草菌具有很强的营养适应性,
3、虫草有性型及其无性型关系的分子确证
虫草属真菌寄主范围较狭窄,但其生活史中存在着有性型和无性型两种不同阶段,在两者对应关系的确证上,Koch法则最可靠,即把无性型接种到相应的寄主上培养出子实体,但由于很多虫草的天然生长条件很难模拟,难以培养出子实体,所以很难推广应用,其它几种生物学的确证方法也都各有其局限性。然而,近些年来,分子生物学手段在虫草有性型及无性型对应关系的确证方面逐渐显示出良好的应用前景。ITS区是rDNA转录单位的一个部分,它是由两个不编码的ITS1和ITS2构成,由于ITS区相对较短,PCR容易将其扩增,且该区在属内种间具长度的保守性和核苷酸序列的高度变异
4、冬虫夏草无性型的鉴定和生长特性研究
首先对冬虫夏草分离株进行了分子鉴定,全面研究其培养特征,测定其有效成分,这些研究为冬虫夏草无性型未来的商业化开发奠定了基础,为人工培养虫草菌丝体代替天然冬虫夏草提供依据。 采用PCR及DNA测序的方法,对所保藏的冬虫夏草分离株rDNA ITS全序列进行分析,该分离株和数据库中AB067721完全相同,与AJ309359(Hirsutella sinensis,贵州大学)相比在544位多一个G,在83位C与AJ488274的A相区别,以上结果表明分离株为冬虫夏草的真正无性型-中国被毛孢。同时和蛹虫草rDN
5、功能性食药用菌蛹虫草的开发技术研究
本文对蛹虫草的人工栽培技术和液体深层发酵的条件进行了研究。 首先通过探讨种源、营养条件(碳源、氮源、料液比)、环境因素(温度、湿度、光照、通气)对蛹虫草人工栽培的影响表明:栽培出优质、高产的蛹虫草需要优质的种源,最佳碳源为淀粉,最佳氮源为硝酸钾,大米与营养液的最佳比例为1:1.2,其菌丝体需要完全避光培养,在温度20~25℃、相对湿度为55~70%的环境中生长状况最佳;待菌丝体吃透培养基后应进行光照刺激,诱导子实体产生,此时培养温度为15~20℃,相对湿度为70~85%,还要采取通气措施促进生长。在摇瓶液
6、几种虫草无性型及其相关真菌混合培养的研究
虫草是一种名贵的中药材,它的显著的药理活性和生长条件的严格性导致其产量和人类需求之间的矛盾日益加剧;目前,人们都致力于利用虫草无性型人工发酵物代替野生虫草的研究。为了充分利用实验室保存的珍贵的虫草资源,本研究从虫草无性型及其相关真菌混合培养的角度对蝉棒束孢和古尼拟青霉与地顶孢霉之间的关系进行了研究。依据实验室先前的研究成果,试验中选择了在成分和活性研究方面比较突出的2株古尼拟青霉和3株蝉棒束孢与1
7、人工培养北虫草质量控制关键技术与质量评价体系研究
通过常规鉴别、生物学鉴别、有效成分含量测定、常规项目检查等一系列检测手段,对人工培养北虫草进行系统地研究,为人工培养北虫草制定质量控制标准和评价体系;同时对培养基中有效成分进行定量分析,为培养基的综合利用提供一定科学依据。方法:利用聚丙烯酰胺凝胶电泳定性分析、UV定量分析、氨基酸含量分析、HPLC定量分析、水分分析、浸出物分析等方法,对人工培养北虫草子实体及培养基中一系列成分进行系统研究。结果:1.不同基质培养北虫草的蛋白质PAGE图谱条带数目及泳动率均存在差异,说明各样品间有区别。2.子实
8、人工培养蛹虫草有效成分的研究及其害螨的化学防治
首次对于人工蛹虫草在培养过程中粗脚粉螨的危害做了室内毒力测定,对于常规螨的室内毒力测定方法(玻片浸液法)进行了改进,并且筛选处理杀螨药剂,为其化学防治提供理论依据。本文还对虫草中的核苷类物质(腺苷、虫草素)的检测方法进行了改进,采用高效液相色谱法进行测定,选用了与文献报道方法不同的氰基色谱柱以及纯水和甲醇的流动相,使检测方法快捷简便。本实验采用NBT还原法测定超氧化物歧化酶,对测定过程中的影响因子作了研究,并从人工蛹虫草的子实体中提取出来对其性质作了初步研究。在以上对于核苷类物质和超氧化
9、人工蛹虫草质量标准及指纹图谱研究
为了确保人工蛹虫草合理有效的应用,使其质量评价有具体的量化指标,本文以大米为培养基的蛹虫草子实体为研究对象,系统地建立了药材的质量标准,并采用了包括指纹图谱在内的质量控制手段,为人工蛹虫草的质量控制研究提供了可以借鉴的思路和方法,为以后药材的质量评价提供了相应的依据。系统地研究了人工蛹虫草质量控制的各项指标
10、蛹虫草子实体形成机制的初步研究
从人工栽培的蛹虫草子实体分离了S和V两个群体的单子囊孢子菌株各55株,从中随机选取部分菌株,观察无性型产孢结构,进行子实体产生试验。多数菌株表现为单一菌株不能产生子实体,不同菌株混合配对可以产生子实体,但也存在单一菌株能够产生子实体的现象。没有发现子实体的形成与无性型产孢结构有明显的相关性。从单子囊孢子菌株产生的子实体上再分离单子囊孢子后代、单子囊孢子菌丝尖端后代和单细胞后代
11、蛹虫草固体栽培及下脚料深加工工艺研究
深入而系统地研究了蛹虫草固体栽培技术和蛹虫草栽培下脚料中虫草多糖和虫草素的提取纯化工艺、检测方法、结构鉴定以及虫草多糖和虫草素综合提取的工艺路线,得到了满意的结果。1、蛹虫草固体栽培需从优良菌种的选择、培养料的科学配制以及栽培的精心管理等几个环节加以注意,方可获得优质、高产。2、蛹虫草栽培下脚料中虫草多糖的提取,热水提取法优于超声波:水提法;虫草素的提取,超声波酒精提取法略优于热水提取法、酒精热回流提取法和超声波水提取法
12、蛹虫草培养基的综合利用研究
深入而系统地研究了蛹虫草固体培养基中虫草素虫草多糖的提取纯化工艺、检测方法、结构鉴定和虫草多糖抗氧化活性以及蛹虫草的固体液体发酵,得到了满意的结果。1.对蛹虫草进行固体液体发酵,应用高效液相色谱对液体发酵的菌丝和发酵液中虫草素的含量进行检测,结果发现菌丝在第七天,发酵液在第八天虫草素的含量最高。固体发酵确定40天为一个周期,蛹虫草的长势良好。2.对影响虫草素提取率的工艺参数进行正交实验研究,确定用75%乙醇超声波提取三
13、蛹虫草培养及其生理活性物质研究
研究了蛹虫草在人工固体培养条件下的光温生物学特性和光温对蛹虫草子实体中虫草素含量的影响、液体培养条件的有关参数及其对蛹虫草菌丝体生物量和蛹虫草多糖含量的影响、蛹虫草多糖的分子量分布以及蛹虫草多糖对果蝇寿命的影响。为高产优质的蛹虫草子实体和主要活性物质的生产提供了基础依据。研究表明:光照、温度、碳源和氮源都能显著影响蛹虫草的生长、生物量、虫草素和虫草多糖的含量。(1)在固体培养过程中,蛹虫草生长发育的适宜温度是17-25℃,子实体生长的
14、蛹虫草人工培养技术及其主要有效成分调控的研究
蛹虫草的人工培养方式包括液体发酵和固体发酵,有关蛹虫草有效成分含量的影响因素的研究在液体发酵中较多,而同体发酵中大多仅限于对子实体生长条件优化。本文研究了培养条件及培养基对蛹虫草子实体生长及有效成分合成的影响,为高产优质的蛹虫草子实体和主要活性物质生产提供一定的基础依据。1.研究了培养条件(光照、温度、培养时间)对蛹虫草原基形成、子实体生长及有效成分含量的影响,主要结果如+F:(1)光
15、采收北虫草后的栽培废料的资源化研究 16、冬虫夏草培育装置与其培育方法和用途 17、人工培育冬虫夏草方法 18、全天然冬虫夏草超细粉末与其制备方法 19、人工培植冬虫夏草 20、富铬冬虫夏草菌丝体生产工艺 21、用家蚕培育生产冬虫夏草方法 22、冬虫夏草菌粉与活性免疫虫草多糖冻干粉生产方法与产品 23、人工北虫草培养基 24、一种北冬虫夏草子实体人工培育方法与其鲜活虫草产品 25、北冬虫夏草高产栽培与虫草新产品加工技术 26、用昆虫培育冬虫夏草新技术 27、用液体培养基对冬虫夏草属菌株进行种子培养方法和装置 28、人工栽培北冬虫夏草提高其生理活性物质含量方法 29、一种冬虫夏草菌粉与其生产工艺 30、红景天和冬虫夏草组合物与其制备方法 31、巴西虫草菌丝体深层发酵培养方法 32、冬虫夏草多糖乳液与其制备方法 33、冬虫夏草生物活性多维强化剂制备方法 34、一种北虫草炮制方法 35、一种工厂化开放式培养北虫草等食用菌方法 36、冬虫夏草无性阶段固体发酵工艺 37、冬虫夏草无性阶段连续发酵工艺 38、一种冬虫夏草加工方法 39、冬虫夏草菌粉与活性免疫虫草多糖冻干粉生产方法与产品 40、北冬虫夏草培养液 41、一种液体深层培养冬虫夏草节能方法 42、冬虫夏草全人工培养方法 43、冬虫夏草无性世代菌种发酵滤液/发酵物与其应用 44、一种虫草真菌与其分离方法 45、大规模生产虫草菌和灵芝菌方法 46、一种中国冬虫夏草真菌生产方法 47、大米袋栽高效益北冬虫夏草技术 48、一种冬虫夏草半合成培养基 49、冬虫夏草大规模发酵生产与菌粉加工工艺 50、冬虫夏草菌丝体抽提物分离物与经口摄取用组合物 51、冬虫夏草菌/蛹虫草菌培养方法 52、冬虫夏草细胞液制备方法 53、人工培植冬虫草子实体与其生产方法 54、一种北冬虫夏草固体培养方法 55、北冬虫夏草生产工艺 56、一种北冬虫夏草液体菌种营养基制备方法与其应用 57、发酵冬虫夏草菌丝体微粉/制备方法与其应用 58、以黄粉虫蛹为寄主蛹虫草子实体与其培育方法 59、一种蛹虫草培育基质配方和蛹虫草增氧培育方法 60、冬虫夏草菌一种仿生学培养方法 61、泰山虫草与其人工培育方法 62、一种冬虫夏草培养方法与其专用培养基 63、提高冬虫夏草菌丝体发酵收率培养基与其制备方法 64、蛹虫草液体静置培养技术 65、一种连续提取北冬虫夏草子实体有效成分方法 66、一种高活性野生虫草菌株与其子实体和人工栽培方法 67、一种复合功能型北冬虫夏草与其生产方法 68、一种冬虫夏草发酵菌粉制备方法 69、富铬九州虫草生产工艺与其培养基 70、一种北冬虫夏草子实体培养方法 71、超临界二氧化碳萃取北冬虫夏草黄酮类化合物方法 72、一种高含量虫草素北冬虫夏草工业化培养方法 73、一种提高青藏高原冬虫夏草产量方法 74、一种提高野生冬虫夏草产量方法 75、一种在蝠蛾圈养场培育冬虫夏草方法 76、一种冬虫夏草生产方法 77、北冬虫夏草菌种培养方法 78、一种北冬虫夏草菌种选育制作方法 79、北冬虫夏草高效快速栽培装置 80、一种富硒北冬虫夏草培育方法 81、一种冬虫夏草生物冷冻干燥方法 82、一种中国冬虫夏草真菌-蝙蝠蛾被毛孢发酵生产方法 83、冬虫夏草专用培养基 84、冬虫夏草人工繁殖方法 85、一种野生冬虫夏草真空冷冻干燥方法 86、表征天然冬虫夏草特性虫草质量评价方法 87、一种用于生产冬虫夏草菌丝体培养基 88、冬虫夏草粉碎方法与制剂 89、一种生产生物硒虫草培养基配方 90、雪花冬虫夏草栽培方法 91、利用静息细胞制备蛹虫草生产种方法 92、一种超临界二氧化碳流体萃取虫草油生产方法 93、人工北冬虫夏草培养基与其制作方法 94、冬虫夏草菌体培育方法 95、蛹虫草培育方法 96、北冬虫夏草菌种培养基 97、用蝇蛆培育冬虫夏草方法 98、一种冬虫夏草菌提取浓缩液制备方法与其应用 99、北虫草抑制真菌有效成份超声波提取方法与相关产品 100、一种虫草 101、小麦栽培北虫草方法 102、青藏高原冬虫夏草增加产量新方法 103、一种采用固体菌种剪口填充式生产蛹虫草方法 104、冬虫夏草规模化培养装置 105、冬虫夏草培养装置 106、虫草液体菌种培养基质 107、一种蚕蛹虫草培育方法 108、生产中药材蛹虫草规范化操作方法 109、一种北冬虫夏草子实体培养基与制备方法 110、一种规模化培育北冬虫夏草用培养器皿 111、规模化生产北冬虫夏草空气净化方法与净化空调系统 112、规模化培育北冬虫夏草培养基熟化与灭菌方法 113、培养冬虫夏草方法 114、作用于北冬虫夏草培养气体方法 115、工业化培养冬虫夏草辅助通风方法 116、培养冬虫夏草静态物理方法 117、作用于北冬虫夏草培养气体方法 118、工业化培养冬虫夏草辅助通风方法 119、培养冬虫夏草静态物理方法 120、培养冬虫夏草方法 121、一种缩短北虫草子实体生长周期培育方法 122、蛹虫草塑料器皿规模化栽培技术 123、红曲协同发酵提高蛹虫草子实体和虫草菌素产量方法 124、提高蛹虫草固体培养基中虫草菌素含量方法 125、微型拱棚盘育蛹虫草方法 126、一种新型虫草菌与其人工栽培虫草方法 127、用膜过滤生产冬虫夏草菌丝粉方法 128、不用转鼓真空过滤生产冬虫夏草菌丝粉方法 129、一种冬虫夏草配养料配制方法 130、一种生产虫草素方法与高产蛹虫草菌株BYB-选育与应用 131、脱罐液体菌种生产蛹虫草方法 132、一种富锌蛹虫草菌丝体人工培养方法与其培养基 133、一种富锌蛹虫草子实体人工培养方法与其培养基 134、一种通过发酵生产冬虫夏草方法 135、蛹虫草人工培养方法 136、一种用于北虫草栽培容器 137、一种九州虫草子实体人工培养方法与其培养基 138、一种北虫草液体菌种培养基配方与培养方法 139、高效节能高纯度虫草素提取与生产方法 140、人工培养蛹虫草废液中有效成分絮凝提取方法 141、以幼虫为寄主人工培育活体虫草与其培育方法 142、一种北冬虫夏草液体培养基用添加剂 143、一种北冬虫夏草诱变菌株与培育方法 144、用中华被毛孢培育冬虫夏草子座方法 145、一种快速区分蛹虫草交配型分子检测方法 146、一种两段式规模化蛹虫草栽培方法 147、一种蛹虫草菌种培养方法 148、一种发酵冬虫夏草菌丝体干燥方法 149、一种北冬虫夏草液体菌种生产方法 150、以木薯蚕蛹为寄主培育木薯蚕蛹虫草与其培育方法 151、一种冬虫草菌丝体生产工艺 152、高寒虫草产区冬虫夏草野培与植被复新方法 153、培养蝙蝠蛾虫草方法 154、北冬虫夏草种植方法 155、虫草种植保温装置 156、一种规模化培育北冬虫夏草方法 157、冬虫夏草菌固体发酵法 158、一种简易蛹虫草菌种复壮方法 159、一种活体蚕蛹栽培蛹虫草方法 160、一种人工培植蛹虫草子实体提取物与其制备工艺 161、蛹虫草固体菌种培育方法 162、一种蛹虫草工厂化培养方法 163、一种蛹虫草菌种选育方法 164、一种北冬虫夏草子实体培养基与其制备方法 165、带调温装置虫草培养架 166、一种用于培养北冬虫夏草培养架 167、一种人工培植硒虫草子实体生产中加水针头 168、一种高效浓缩虫草菌丝体工艺 169、蛹虫草退化菌种快速鉴定方法 170、冬虫夏草菌种制备与工厂化栽培 171、工业化节能低碳培育北虫草方法 172、一种北虫草栽培架与其制作方法 173、一种高含量生物活性物质蛹虫草子实体栽培方法 174、冬虫夏草菌丝体和子实体栽培方法 175、一种从北冬虫夏草培养基残基中提取虫草素和虫草多糖方法 176、一种用于蛹虫草栽培容器 177、富硒蛹虫草培养方法 178、一种酒糟养殖北虫草方法 179、一种利用饮料瓶栽培北虫草方法 180、一种冬虫夏草蒸润方法与其蒸润装置 181、一种蛹虫草子实体人工培养方法与其培养基 182、一种全人工培养冬虫夏草方法 183、培育蛹虫草专用培养容器 184、一种北虫草栽培架 185、用于北虫草液体发酵过程温度智能控制装置 186、一种用于蛹虫草栽培容器 187、一种冬虫夏草蒸润装置 188、一种虫草素提取方法 189、蛹虫草菌株复壮方法 190、北冬虫夏草人工培育新工艺 191、北冬虫夏草人工培育方法 192、冬虫夏草冻干粉与制备方法 193、北冬虫夏草菌人工栽培子实体方法 194、北冬虫夏草提取液与其制备方法 195、北冬虫夏草生产与深加工新技术 196、富硒北冬虫夏草人工栽培方法 197、冬虫夏草活性组份与其分离方法 198、活性北冬虫夏草与其制剂 199、冬虫夏草深层发酵工艺 200、冬虫夏草茶与其制造方法 201、富锶北冬虫夏草人工栽培方法 202、一组富硒北冬虫夏草药膳与其制备方法 203、冬虫夏草菌深层培养液 204、无蚕蛹提取液冬虫夏草深层培养方法 205、北冬虫夏草菌丝体发酵工艺 206、中国冬虫夏草真菌发酵生产方法 207、冬虫夏草发酵产物制备方法与其应用 208、鉴别冬虫夏草方法 209、一种冬虫夏草子实体生产方法与其应用 210、冬虫夏草球状菌体 211、人工培养冬虫夏草菌粉入药方法 212、北冬虫夏草生产基质中有效成分提取方法 213、北冬虫夏草子实体培养方法 214、冬虫夏草药物组合物与其制备方法
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