呕吐毒素定量检测试剂盒

呕吐毒素定量检测试剂盒（酶联免疫法）说明书

【概要】

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol，DON)又称呕吐毒素(vomitoxin)，主要是由禾谷镰刀菌产生的有毒代谢产物。其污染常出现于小麦、大麦、玉米和饲料中。研究表明，DON可能对免疫系统有影响，有明显胚胎毒性和一定致畸作用，可能有遗传毒性，但无致癌、致突变作用。

【实验原理】                  

检测基于抗原抗体反应，酶标板微孔条上预包被DON偶联抗原，加入校准品/样本溶液、酶标试剂以及抗体工作液后，校准品/样本中DON同微孔条上预包被抗原竞争抗体上的抗原结合位点。微孔条上预包被抗原结合的抗体量与校准品/样本中残留DON浓度呈负相关。经TMB底物显色，样本吸光值与其残留物DON的含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中DON的含量。

【检测范围】

适用于谷物、DDGS、玉米胚芽粕/饼、喷浆玉米皮、玉米蛋白粉、配合饲料等样本中呕吐毒素的定量检测。

关于检测样本的说明：在追求简便高效的同时，试剂盒针对不同种类的饲料样本进行了必要的优化，但一些特殊样本仍可能对试剂盒造成影响。为此，我们开发了针对特殊样本的前处理方法。如有特殊样本需检测，请致电我们，我们会最大程度保证您的检测准确性。

【技术参数】

最低检测限	250ppb
反应温度	20～25℃
反应时间	20min

【试剂盒组成】                           

校准品1～5浓度分别为：0ppb、250ppb、1000ppb、2000ppb、5000ppb。（1ppb=1ng/mL=1ng/g=1μg /kg）（注：样本在前处理过程中已稀释50倍，校准品实际浓度为设定浓度的1/50，计算原始样本浓度时无需换算。）

【所需材料】（不提供）

设备	备注	设备	备注
酶标仪	450/630nm	天平	感量0.01g
振荡器或摇床		离心机（或whatmanNO.1滤纸）	4000rpm
实验用粉碎机 或粮食碾磨机	20目以上	移液器（及枪头）	单道10～100mL、100～1000mL 多道30～300mL
量筒	50mL	离心管	1.5mL
洗板机（或洗瓶）		甲醇	分析纯
玻璃容器	100ml以上，有盖	加样槽、吸水纸、计时器、蒸馏水

【注意事项】

?  每种试剂仅适于龙科方舟DON试剂盒，其他生产商的试剂不可替代本试剂盒中的任何试剂，不同批次产品中试剂不可混用；

?  不可使用过期试剂。

?  试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，用前回温至20～25℃，并避免试剂在室温条件存放过久。

?  浓缩洗液在4℃保存可能有结晶析出，于60℃水浴中加热溶解即可。

?  校准品、底物液B以及样本提取物对光敏感，避免直接暴露在光线下。

?  校准品易挥发，使用后应立即盖紧瓶盖。

?  终止液为2M 硫酸，避免皮肤及黏膜接触。

?   DON为剧毒物质，将所有丢弃的液体倒入盛有家用漂白粉(不低于10%)的塑料容器中，所有的实验器具必须在30%次氯酸钠溶液中浸泡至少1h，穿戴手套、防护服，避免与试剂直接接触，一旦接触，必须立即用大量水冲洗。