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Elisa试剂盒——Elisa实验常见问题及解决方案

现白板，兽药残留ELISA试剂盒公司，阳性对照不显色?

1 ?显色液变质 更换新的显色液

2 ?洗涤液配制有误 请按说明书所示稀释倍数配制

3 ?未加酶结合物而认为已加入 注意不要漏加

4 ?终止液误作洗涤液稀释或当底物液使用 每次加液前均应看清标签

5 ?标准品稀释方法错误/或标准品有问题 请按照说明书所示配置说明书，注意单位和稀释倍数

6 ?不同试剂盒或不同批号的试剂混用 建议使用同批次试剂盒。不能混用不同试剂盒或不同批号的试剂。

Elisa试剂盒——Elisa实验常见问题及解决方案

显色淡，灵敏度偏低

1 ?试剂盒未充分平衡 试剂盒从2～8℃冰箱取出后打开盒盖，于室温平衡至少20分钟，确保所有试剂已平衡至室温（约25℃）

2 ?样品不适合做ELISA检测 样品一般选择培养上清、血浆。其他样品形式可能不适合做ELISA检测或者需要优化检测的条件（例如稀释液的成分）

3 ?酶标板在贮存或洗后拍干时过分干燥 防止板过于干燥

4 ?包被抗体遭到破坏 操作温和，移液枪不能碰到孔底

5 ?样本和抗体孵育条件不合适 按照说明书条件，建议孵育过程中全程振荡孵育。

6 ?洗涤浸泡时间过长 按照说明书操作。勿人为增加浸泡时间；

7 ?偶联HRP试剂污染 弃去试剂，玉米赤霉烯酮ELISA试剂盒公司，重新配置

8 ?错误的稀释偶联HRP试剂 弃去试剂，重新配置

9 ?TMB底物孵育时间过短，因非人为因素影响，需要优化孵育时间 确定合适的孵育时间：人为判定-高浓度的标准品出现深蓝色；S4-5有淡蓝色；机器判定620 nm波长下测定OD值达到0.6-0.65

10 ?样本浓度过高或存在基质效应 建议做不同稀释倍数，确认样本稀释倍数。

11 ?滤光片设置有问题或者波长选择不对 确认仪器设置及选择正确的波长检测。

12 ?酶标板不适合做ELISA 不能使用细胞培养板，建议使用ELISA专用高吸附力板子。

ELISA试剂盒的应用领域

ELISA法是诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的病种等方面的诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查，酶联ELISA试剂盒公司，而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本，ELISA试剂盒公司，因此，也适合于流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大，可概括四个方面：

1、酶染色各种细胞内成份的定位。

2、研究抗酶抗体的合成。

3、显现微量的沉淀反应。

4、定量检测体液中抗原或抗体成份。

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