基因敲除

实验动物的采集方法

1. 大鼠、小鼠的采集：用颈椎脱臼法处死动物，剥离出胸骨或股骨，用吸取少量的Hank平衡盐溶液，基因敲除小鼠，冲洗出胸骨或股骨中全部液。如果是取少量的作检查，可将胸骨或股骨剪断，将其断面的挤在有稀释液的玻片上，混匀后涂片凉干即可染色检查。

2. 大动物的采集：狗等大动物的采集可采取穿刺方法。 先将动物、固定、局部除毛、消毒皮肤，然后估计好皮肤到的距离，把穿刺针的长度固定好。操作人员用左手把穿刺点周围的皮肤绷紧，右手将穿刺针在穿刺点垂直刺入，穿入固定后，轻轻左右旋转将穿刺针钻入，当穿刺针进入腔时常有落空感。狗的采集，一般采用髂骨穿刺。

狗等大动物常用的穿刺点：胸骨：穿刺部位是胸骨体与胸骨柄连接处。肋骨：穿刺部位是第5～7肋骨各点的中点。胫骨：穿刺部位是股骨内侧、靠下端的凹面处。如果穿刺采用的是肋骨，动物模型，穿刺结束后要用胶布封贴穿刺孔，防止发生。

记忆再现缺失动物模型怎么制备/

　　1.建模材料动物：老鼠1，药1物：酒精，设备：DS-2老鼠声光单向穿梭箱。

　　2.建立模型的方法是训练以避开黑暗。训练后，在重新测试前30分钟给予小鼠40％酒精0.1 ml/10 g，然后重新测试并在30分钟后测试记忆力。也可以使用皮下1注射，并且在训练前5分钟和训练后24小时向小鼠注射10 ml/kg的40％酒精。

　　避免使用深色方法：在实验过程中，基因敲除，将鼠标脸放回明亮房间的孔中，然后同时启动计时器。动物离开洞穴，进入黑暗的房间，受到电1击，计时自动停止。弹出鼠标，疾病动物模型购买，记录下进入暗室所需的时间，然后将其置于暗室中，然后经历电1击。这是潜伏期。 24小时后重复测试，并记录进入暗室的动物数量，潜伏期和5分钟内的电1击次数（错误的次数）。如果您没有在5分钟内进入暗室，则潜伏期为300秒。

　　3.建模原理酒精具有抑制情绪的作用，这可能会影响记忆力。

　　4.建模后的更改。激动时，我在服药后20分钟内出现，此后变得安静，但步态却摇摆不定。暗保护方法表明正常对照组的测试错误数为（0.96±0.58）s，测试错误的潜伏期为（221.2±29.8）s。模型组中的测试错误数为（3.74±0.69），测试错误的潜伏期为（48.7±19.3）s。平台跳跃和水迷宫实验均显示出明显的记忆障碍。

抑yu症应激动物模型

(一)行为绝望模型

行为绝望模型具有简单、快速、敏感等特点，常用于抗抑郁yao物的快速筛选。小鼠悬尾实验：悬尾小鼠为克服不正常体位而挣扎活动，但活动一定时间后，出现间断性不动，显示“绝望”状态，多数可有效缩短小鼠的不动时间。

(二)获得性无助模型

获得性无助是一种当大鼠接受无法控制或预知的厌恶xing刺激后，将其放在可以逃避dian击的环境中时，呈现出的逃避行为欠缺的现象，同时可伴有如食欲减退、体重减轻、运动性活动减少、攻击性降低等现象。多种临床对抑yu症有效的yao物和zhi疗方法可逆转“获得性无助”现象。

(三)慢性不可预见性应激模型

大鼠经历一系列严重的应激因子(如噪声、强光刺激、长时间行为限制等)后表现出活动能力下降。将几种不同的应激因子在实验全程中应用，顺序随机，使动物不能预料刺激的发生。主要模拟了人类yi郁的核心症状即快感缺乏，同时模拟了其他重型yi郁障碍的症状表现。如运动能力及社会交往能力下降、探索行为能力下降、qin犯攻击能力缺陷、xing行为能力下降等。

(四)孕期应激致子代抑郁模型

出生前暴露在应激条件下的SD大鼠，成年期会出现持续的行为、神经内分泌和睡眠结构等改变，如行为焦躁、HPA轴功能亢进、矛盾睡眠增加，并与血浆皮质酮水平高度相关。在睡眠中的突出变化在很大程度上与yi郁障碍患者相似。

(五)社会挫败模型

具代表性的是地鼠的压抑模型，它是人为地将雄性地鼠配对饲养在同一环境中。两鼠之间会有“强”、“弱”之分，在“强”鼠面前，“弱”鼠出现体重减轻、自主活动减少、 HPA轴及交感神经亢奋的表现。这些症状可在一定程度上被一定剂量的抗yi郁药反转。

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