黄曲霉毒素B1检测试剂盒

厂商 :昆明诺金科技有限公司

云南 昆明
  • 主营产品:
  • 食品安全检测卡
  • 面积测量仪
  • 超声波探伤仪器
联系电话 :15368897348
商品详细描述

一、产品概要

黄曲霉毒素是一类真菌(如黄曲霉和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,它们具有很强的致癌性,主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些和人类血液,动物饲料相关的产品中。薄层色谱一直是检测黄曲霉毒素常用的方法,但是此方法制备样品及分析样品时费时又费力。而使用黄曲霉毒素总量ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素残留。本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代真菌毒素检测产品,操作时间短于60min,能最大限度地减少操作误差和工作强度。

二、试剂盒原理

黄曲霉b1检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测液态奶、奶粉、淡奶油、发酵乳等样品中的黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1),试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时,加入标准品或样品溶液,样本中的黄曲霉毒素B1和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗黄曲霉毒素B1抗体,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样本吸光度值与其所含黄曲霉毒素B1含量成负相关,与标准曲线比较即可得出样本中黄曲霉毒素B1的残留量。  

三、使用范围

黄曲霉b1检测试剂盒可定性、定量检测各种饲料、及各种谷类样本中黄曲霉b1的残留量。

四、 技术指标

2.1 试剂盒灵敏度:0.1ppb

2.2 反应模式:25℃,30min~15min。

2.3 样本检测下限:

谷物及配合饲料:3ppb  花生:3ppb  食用油:3ppb  酱类、麦类、DDGS等饲料:3ppb   啤酒:3ppb

葡萄酒、酱油、醋:1.5ppb

2.4 样本回收率:

谷物及配合饲料:85%±15%  花生:82±15%  食用油:85±15%  酱类、麦类、DDGS等饲料:83±15%

啤酒:84±15%  葡萄酒、酱油、醋:87±15%

五、试剂盒组成

酶标板、标准液(6个)、高标准液、酶标记物、抗体工作液、底物液A、底物液B、终止液、浓缩洗涤液、复溶液

六、贮藏条件及保存期

储藏条件:试剂盒于2-8℃保存,不要冷冻。

保 质 期:该产品有效期为1年,生产日期见包装盒。

 

 

操作步骤

一、样本前处理

产品适用于谷物及配合饲料、食用油、酱类、麦类、DDGS等饲料、葡萄酒、酱油、醋等样本检测,具体处理方法参见相应说明书。

二、 酶联免疫实验步骤

将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上。

1 编    号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。

2 加样反应:加标准品或样本50?l/孔到各自的微孔中,然后加酶标记物50?l/孔,再加抗体工作液50?l/孔,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光反应30分钟。

3 洗    涤:将孔内液体甩干,用工作洗涤液250?l/孔充分洗涤5次,每次间隔30秒,最后用吸水纸拍干。

4 显    色:加底物液A 50?l/孔,再加底物液B 50?l/孔,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光显色15分钟。

5 终    止:加终止液50?l/孔,轻轻振荡混匀,终止反应。

6 测吸光值:用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(建议用双波长450/630nm)。测定应在终止反应后10分钟内完成。

 

1 百分吸光率的计算
    标准品或样本的百分吸光率等于标准品或样本的百分吸光度值的平均值(双孔)除以第一个标准(0ppb)的吸光度值,再乘以100%,即
 百分吸光度值(%)= A ×100%
 A0 
A:标准溶液或样本溶液的平均吸光度值
A0:0ppb标准溶液的平均吸光度值
2 标准曲线的绘制与计算
    以标准品百分吸光率为纵坐标,对应的标准品浓度(ppb)的对数为横坐标,绘制标准品的半对数曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中,从标准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中待测物的实际浓度。
    若利用试剂盒专业分析软件进行计算,更便于大量样本的准确、快速分析。



黄曲霉毒素B1

B 为本词条添加义项名 
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黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1简写为AFB1)是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物,含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素)。黄曲霉毒素B1是已知的化学物质中致癌性最强的一种。黄曲霉毒素B1对包括人和若干动物具有强烈的毒性,其毒性作用主要是对肝脏的损害。

基本信息

  • 中文名称

    黄曲霉毒素B1

  • 外文名称

    Aflatoxin B1

 
  • 简称

    AFB1

  • 特性

    黄曲霉毒素能溶于多种极性有机溶剂

目录
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1 基本概述2 毒素特性3 毒素代谢4 毒性特征4.1 人类4.2 动物5 法规规定6 检测方式6.1 薄层色谱法(TLC)6.2 液相色谱法6.3 酶联免疫法(ELISA)6.4 液相色谱串联质谱法7 防范措施8 相关报道

1 基本概述

在天然食物中以黄曲霉毒素B1最为多见,危害性也最强,国家质检总局规定黄曲霉毒素B1是大部分食品的必检项目之一。

2 毒素特性

黄曲霉毒素能溶于多种极性有机溶剂,如氯仿、甲醇、乙醇、丙醇、乙二甲基酰胺,难溶于水,不溶于石油醚、乙醚和己烷。黄曲霉毒素对光、热、酸较稳定,只有加热到280—300℃才裂解,高压灭菌2小时,毒力降低25%—33%,4小时降低50%。

黄曲霉毒素B1 - 存在 黄曲霉毒素B1污染的食物主要是花生、玉米、稻谷、小麦、花生油等粮油食品,且以南方高温、高湿地区受污染最为严重。黄曲霉毒素耐热,280℃才可裂解,故一般烹调加工温度下难以破坏。

3 毒素代谢

黄曲霉毒素B1的代谢主要发生在肝脏,它在细胞色素P450混合功能氧化酶的作用下转化成黄曲霉毒素M1、黄曲霉毒素M2、黄曲霉毒素P1、黄曲霉毒素Q1、黄曲霉毒素B2α、黄曲霉毒素醇等物质。黄曲霉毒素B1通过羟基化作用转化成黄曲霉毒素M1(AFM1)。

黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的代谢产物,不同动物以牛奶中的AFM1代谢物含量最高。

4 毒性特征

黄曲霉毒素B1的毒性要比呕吐毒素的毒性强30倍,比玉米赤霉烯酮的毒性强20倍。黄曲霉毒素B1的极性毒性是氰化钾的10倍,砒霜的68倍,慢性毒性可诱发癌变,致癌能力为二甲基亚硝胺的75倍,比二甲基偶氨苯高900倍,人的原发性肝癌也很可能与黄曲霉毒素有关。

4.1 人类

(1)人类肝癌和食道癌(黄曲霉毒素),(2)疫病易感性增加。

4.2 动物

家禽:(1)采食量,体增重和饲料转化率降低;(2)不孕,流产;(3)肺水肿,(4)疫病易感性增加。

猪:(1)采食量,体增重和饲料转化率降低;(2)不孕流产,(3)肺水肿,(4)疫病易感性增加。

奶牛:(1)采食量,产奶量,体增重和饲料转化率降低;(2)繁殖性能紊乱,胚胎死亡和流产;(3)神经系统紊乱,痉挛和缺乏协调性;(4)疫病易感性增加。

5 法规规定

中国食品卫生标准中规定了几种主要易受污染的食物中黄曲霉毒素B1的允许量标准,玉米、花生、花生油中黄曲霉毒素B1允许量为≤20μg/kg;其他食用油为≤10μg/kg;其他粮食、豆类、发酵食品为≤5μg/kg。

6 检测方式

6.1 薄层色谱法(TLC)

TLC法是测定黄曲霉毒素的经典方法,是中国测定食品及饲料中AFT黄曲霉素B1(AFB1)的标准方法之一(GB/T5009.23-1996)。

6.2 液相色谱法

高效液相色谱法对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2分别进行定量分析。黄曲霉毒素免疫亲和柱HPLC法采用单克隆抗体免疫技术,可以特效地将黄曲霉毒素与其他真菌素分离出来,分离效率和回收率高。此方法已得到广泛应用,并被美国官方分析化学家协会(AOAC)确认为官方检测方法。该方法的检测限可达0.02~5ppb。

6.3 酶联免疫法(ELISA)

酶联免疫法检测AFB1的理论基础是抗原抗体反应,其采用单克隆或多克隆抗体技术,具有特异性强、分析时间短等有点,但稳定性较差,分析结果的准确性不高。

6.4 液相色谱串联质谱法

一般来说,组织中黄曲霉毒素含量很低,而液相色谱串联质谱法具有比高效色谱法更高的灵敏度和准确性,目前这种方法还极少使用在测定组织霉菌毒素含量中。该方法检测限可达0.02~0.025ppb。

7 防范措施

1、工业饲料要控制好原料,把好饲料关。进厂前要检测B1和水份。饲料原料含水量不超过13%的原则进行控制,对含水量超过标准的应及时干燥后贮存,或者使用防霉剂。饲料的仓库,除了应保持通风、阴凉、干燥外,地面要有木板架撑隔。环境温度高于10℃时,堆放高度不应超过4米。

2、不能使用发霉饲料。一些养殖户喜欢使用沼渣直接作饲料,而且堆放时间长,容易发霉。饲喂奶牛的特别应当慎重。如果要用,应当当天用完。青贮饲料,特别是玉米青贮饲料开窖后容易产生“二次发酵”产生霉菌毒素,应当特别关注。

3、吸附法吸附霉菌毒素:某些矿物质如活性炭、蒙脱石、硼润土、沸石等都有很强的吸附作用而且性质稳定,一般不溶于水,不易被动物吸收,添加到饲料中可减少畜禽对黄曲霉毒素的摄入。

8 相关报道

食用油食用油

国家质检总局2013年1月1日在官网通报了食用油、肉制品、炒货坚果食品等28类产品的质量监督抽查情况,其中部分产品检出了超标的苯并(a)芘、黄曲霉毒素B1,均是强致癌性物质。

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