非洲猪瘟抗原检测ELISA试剂盒

西班牙雅雷萨INGENASA非洲猪瘟抗原检测ELISA试剂盒

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11.PPA.K.2   INGEZIM PPA DAS

试剂盒原理说明

本试剂盒利用双抗体夹心法：将非洲猪瘟抗体预包被于聚苯乙烯微孔板上，加入待检样品后，样品中所有抗原将与其单抗结合。除去非特异性物后，加入酶标记抗体和底物显色。吸光值与酶标记物的含量成正相关，从而检测样品中非洲猪瘟的抗原水平。本试剂盒具有高特异性和准确性的特点。

试剂盒组成

1 预包被板-Anti IgG（microtitration plates anti IgG） 1P

2 阳性标准品（Positive control vials） 0.5ml

3 阴性标准品（Negative control vials） 0.5ml

4 100x酶标记物（Vials with conjugate） 150μl

5 25x清洗液（washing solution） 125ml

6 稀释液（Diluent DE010-01） 2*125ml

7 底物显色液（TMB Substrate buffer） 65ml

9 底物（Substrate） 6.5ml

10 终止液（Stop solution） 65ml

操作程序

1 所有的试剂盒试剂（除了酶标记物conjugate）在使用前须放置室温平衡。

2 每个微孔中加入100μl的已经1：100稀释好的待检样品，同时加入标准阴性和标准阳性品100μl作为对照。混合均匀，盖上盖后37?C温箱避光孵育60min。在试验操作过程中应小心、谨慎防止交叉污染。为了得到可靠的测定结果建议进行双孔重复测定。

3 从温箱取出后，小心迅速地倾倒出反应液后，用1x清洗液 300μl洗4次。

4 加入100 μl酶标记物，盖上盖后37?C避光温箱孵育30min

5 从温箱取出后，倾倒出反应液后用1x清洗液 300μl/孔 洗4次。

6 加入100μl的底物（如样品数量多，建议使用排枪滴加，确保反应时间的相同），室温避光孵育5min。

7 在每孔中迅速加入终止液100 μl。

8 使用ELISA酶标仪读取450nm下的吸光度值（OD值）。