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商品详细描述
本发明公开了一种从螺旋藻中分离纯化高纯度藻蓝蛋白的方法，先将螺旋藻粉原料采用0.05～0.5M的磷酸缓冲液浸提法，使藻蓝蛋白从螺旋藻细胞中渗出，向藻蓝蛋白粗提液中加入水溶性壳聚糖，控制藻蓝蛋白溶液中壳聚糖质量浓度为0.1％～1％，离心收集上清液；向上清液加入活性炭，离心收集上清液，用质量浓度为30～60％硫酸铵沉淀，使藻蓝蛋白从溶液中沉淀下来，最后用离子交换层析，并用含氯化钠的磷酸缓冲液梯度洗脱，获得高纯度的藻蓝蛋白溶液。本方法具有成本低、耗时短、操作便捷、能耗低、易于大量制备等优点，是一种可大量制备高纯度高活性藻蓝蛋白的高效方法，有助于我国藻蓝蛋白的规模化开发利用。
一种从螺旋藻中分离纯化高纯度藻蓝蛋白的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将螺旋藻粉原料采用0.05～0.5M的磷酸缓冲液浸提法，使藻蓝蛋白从螺旋藻细胞中渗出，在4～12℃，离心收集上清液，得到藻蓝蛋白粗提液；(2)向步骤(1)得到的藻蓝蛋白粗提液中加入水溶性壳聚糖，控制藻蓝蛋白溶液中壳聚糖质量浓度为0.1％～1％，搅拌均匀，调整溶液pH至6.5～7.5，继续搅拌3～15分钟后，在4～12℃，离心收集上清液；(3)向步骤(2)所得的上清液加入活性炭，搅拌3～10分钟，离心收集上清液，再次向所得上清液中加入活性炭，搅拌3～10分钟，离心收集上清液；两次所用活性炭加入量的质量之比为1∶0.5～1∶2，活性炭质量与处理溶液体积之比均为50g/L～100g/L；(4)将步骤(3)所得的藻蓝蛋白溶液，用质量浓度为30～60％硫酸铵沉淀，使藻蓝蛋白从溶液中沉淀下来，离心收集沉淀，再用pH6.5～7.5、5～50mM磷酸缓冲液溶解，并用10～50kDa超滤膜超滤，除去硫酸铵；(5)在8～20℃，避光条件下，将步骤(4)制得的藻蓝蛋白溶液，用离子交换层析，并用含0.05～0.25M氯化钠的磷酸缓冲液梯度洗脱，获得高纯度的藻蓝蛋白溶液。
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