连翘提取物

　方法名称： 连翘提取物－连翘苷的测定－高效液相色谱法 　　应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定连翘提取物中连翘苷的含量。 　　本方法适用于连翘经加工制成的提取物。 　　方法原理： 本品加甲醇超声处理，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液蒸干，过柱，洗脱液浓缩至干，残渣用50%甲醇溶解定容，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长277nm处检测连翘苷的吸收值，计算出其含量。 　　试剂： 1. 乙睛 　　2. 甲醇 　　3. 50%甲醇 　　4. 70%乙醇 　　仪器设备： 1 仪器 　　1.1 高效液相色谱仪 　　1.2 色谱柱 　　十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按连翘苷峰计算应不低于3000。 　　1.3 紫外吸收检测器 　　2色谱条件 　　2.1流动相：乙睛 水 ＝25 75 　　2.2检测波长：277nm 　　2.3柱温：室温 　　试样制备： 1. 称取供试品 　　精密称定本品1g，为供试品。 　　2. 对照品溶液的制备 　　精密称取连翘苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.2mg的溶液。 　　3. 供试品溶液的制备 　　取本品约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇15mL，称定重量，浸渍过夜，超声处理（功率100W，频率40kHz）25分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，蒸至近干，加中性氧化铝1.5g，拌匀，加置中性氧化铝柱（100~200目，3g，内径1~1.5cm）上，用70%乙醇240 mL洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣用50%甲醇溶解并转移至10mL量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。 　　操作步骤： 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长277nm处测定连翘苷（C29H36O15）的峰面积，计算出其含量。 　　参考文献： 中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p275。