人参水溶性蛋白膜分离纯化制备方法

本发明属于蛋白质分离纯化技术领域，具体涉及一种采用缓冲液抽提、膜分离技术纯化制备人参水溶性总蛋白的方法。其是将人参粉成细粉后，加入中性缓冲液中，进行2～3次浸提，将合并的浸提液经膜孔径为0.22μm～0.65μm的中空纤维膜过滤后，再经截留分子量为10～100kDa的中空纤维膜超滤，从而获得高纯度、高收率的人参总蛋白。本发明具有纯化效果好、处理量大、样品收率高且可用于放大生产等特点。经BCA试剂盒测定，蛋白含量可达50％以上，且收率可达3％以上。
1、人参水溶性蛋白的分离纯化制备方法，其包括如下步骤：(1). 将生晒参粉成80目～100目细粉，每克细粉加入5～10ml、含0.1～0.3mol/L NaCl、pH＝7～8的0.01～0.03mol/L Tris-HCl缓冲液，进行浸提操作，合并2～3次浸提所得上清液，即为人参总蛋白粗提液；(2). 取上述步骤获得的人参总蛋白粗提液，经膜孔径为0.22μm～0.65μm的过滤装置进行微滤，流速20～40ml/min，过膜压力5～10psi，即得人参总蛋白过滤液；(3). 取上述步骤获得的人参总蛋白过滤液，经膜孔径为10～100kDa的过滤装置进行超滤并浓缩，流速20～50ml/min，过膜压力10～20psi，所得内滤液经真空冷冻干燥即为人参水溶性总蛋白。