厂商 :武汉百浩天生物科技有限公司
湖北 武汉市- 主营产品:
- 蛋白提取
- 细胞培养
- 电泳相关缓冲液
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商品详细描述
产品原理:分子筛凝胶只允许小于分子筛孔隙的物质通过,对大于其孔隙的物质不能进入凝胶里面,只能从外面(凝胶与凝胶之间)过去。这样小分子的路径就长一些,后出来,而大分子的路径短,先流出来。
葡聚糖凝胶种类很多,可按照下表选择
Sephadex G系列葡聚糖凝胶参数
使用方法(手工操作):
一般刚拿到手的Sephadex G/葡聚糖凝胶为干粉颗粒。用前,可以用20倍体积的双蒸水泡过夜。或者沸水煮2-4个小时。记得补水。这样Sephadex G/葡聚糖凝胶基本就泡好了。
胶泡好后,将柱子准备好(下筛板装好),先用水冲洗两次。将凝胶混匀(凝胶浓度要适当,太稀会灌得很慢,而太浓的话容易产生气泡,一般1体积的胶,2-3体积的水就可以),轻轻倒入柱中,等柱中液面下降一些后,立刻补加,等胶体积灌得差不多时,静置,让胶完全沉下后,再小心安置上筛板(上筛板不太好安,但多安几次还是能够安好的。可以先装上筛板浸湿,轻轻斜盖在上口,用吸头压入,关键是不能把气泡挤入。再盖平,此时如果筛板上有小量的胶,可以加水混匀再吸走)。此时不停的加水或者其他的缓冲液,不能让柱子干了,如果干了,前面的工作就前功尽弃了,得重新灌了。
如果有条件,可以用蓝色葡聚糖(1mg/ml)检测一下柱子是否灌得均匀。检测方法与样品的过柱方法相同。
检测合格后,就可以上样了。样品保证没有沉淀,如果有的话,可以离心或者过滤去除。
等上筛板上的液体流完,将合适的样品量(不超过柱体积的1/10为好)全倍加入,自然流干。再加少量缓冲液,如0.5ml或者1ml,等流完再加少量缓冲液,如此三次后,就可以多加,或者一直加懑到柱口。
如果下面接了检测器的话就好办,如果没有检测器,而目标样品有颜色,也比较好收集,如果又没有检测器,又没有颜色,可能得分段收集了,这个谁也偷不得懒。
等样品收集完,就是冲上20倍柱体积的缓冲液或者水,让小分子物质也流出来,柱子得到再生(这个可以反向冲洗,也就是将柱子倒过来,从出口加入缓冲液,这个可以接一个合适的软管,用一个桡杯接了水放到高处,利用重力自然往下流)。
葡聚糖凝胶种类很多,可按照下表选择
Sephadex G系列葡聚糖凝胶参数
货号 |
名称 |
分离范围 |
滞留水量 膨胀体积(ml/g) |
颗粒 |
特性及应用 |
工作pH值 清洗pH值 |
规格 |
价格 |
S6030 |
葡聚糖凝胶G-10 Sephadex G-10 |
<700 |
1.0±0.1 2.0-3.0 |
60-100目 |
适用于脱盐,肽与其他小分子的分离。 |
2-13 2-13 |
|
400 |
S6031 |
葡聚糖凝胶G-15 Sephadex G-15 |
100-1500(肽) |
1.5±0.15 2.5-3.5 |
60-100目 |
适用于脱盐,肽与其他小分子的分离。 |
2-13 2-13 |
|
400 |
S6032 |
葡聚糖凝胶G-25 Sephadex G-25 |
1000-5000 |
2.5±0.2 4.0-6.0 |
60-100目 |
脱盐及交换缓冲液用 |
2-13 2-13 |
|
400 |
S6033 |
葡聚糖凝胶G-50 Sephadex G-50 |
1500-30,000 |
5.0±0.5 9.0-11.0 |
60-100目 |
肽类分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定。 |
2-10 2-13 |
|
450 |
S6034 |
葡聚糖凝胶G-75 Sephadex G-75 |
3000-80,000 |
7.5±0.7 12-15 |
60-100目 |
蛋白的纯化和分离、分子测定、平衡常数的测定 |
2-10 2-13 |
|
450 |
S6035 |
葡聚糖凝胶G-100 Sephadex G-100 |
4000-1.5*105 |
10±1.0 15-20 |
60-100目 |
蛋白的纯化和分离、分子测定、平衡常数的测定 |
2-10 2-13 |
|
450 |
S6036 |
葡聚糖凝胶G-200 Sephadex G-200 |
5000-5*105 |
20±2.0 30-40 |
100-200目 |
蛋白的纯化和分离、分子测定、平衡常数的测定 |
2-10 2-13 |
|
560 |
一般刚拿到手的Sephadex G/葡聚糖凝胶为干粉颗粒。用前,可以用20倍体积的双蒸水泡过夜。或者沸水煮2-4个小时。记得补水。这样Sephadex G/葡聚糖凝胶基本就泡好了。
胶泡好后,将柱子准备好(下筛板装好),先用水冲洗两次。将凝胶混匀(凝胶浓度要适当,太稀会灌得很慢,而太浓的话容易产生气泡,一般1体积的胶,2-3体积的水就可以),轻轻倒入柱中,等柱中液面下降一些后,立刻补加,等胶体积灌得差不多时,静置,让胶完全沉下后,再小心安置上筛板(上筛板不太好安,但多安几次还是能够安好的。可以先装上筛板浸湿,轻轻斜盖在上口,用吸头压入,关键是不能把气泡挤入。再盖平,此时如果筛板上有小量的胶,可以加水混匀再吸走)。此时不停的加水或者其他的缓冲液,不能让柱子干了,如果干了,前面的工作就前功尽弃了,得重新灌了。
如果有条件,可以用蓝色葡聚糖(1mg/ml)检测一下柱子是否灌得均匀。检测方法与样品的过柱方法相同。
检测合格后,就可以上样了。样品保证没有沉淀,如果有的话,可以离心或者过滤去除。
等上筛板上的液体流完,将合适的样品量(不超过柱体积的1/10为好)全倍加入,自然流干。再加少量缓冲液,如0.5ml或者1ml,等流完再加少量缓冲液,如此三次后,就可以多加,或者一直加懑到柱口。
如果下面接了检测器的话就好办,如果没有检测器,而目标样品有颜色,也比较好收集,如果又没有检测器,又没有颜色,可能得分段收集了,这个谁也偷不得懒。
等样品收集完,就是冲上20倍柱体积的缓冲液或者水,让小分子物质也流出来,柱子得到再生(这个可以反向冲洗,也就是将柱子倒过来,从出口加入缓冲液,这个可以接一个合适的软管,用一个桡杯接了水放到高处,利用重力自然往下流)。
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