一种鹰嘴豆中原生抗菌多肽制备方法

本发明涉及一种鹰嘴豆中原生抗菌多肽的快速制备方法，该方法通过磷酸缓冲溶液提取、硫酸氨沉淀、以及超滤膜等步骤纯化得到分子量8.5KD的具有抗菌活性的多肽，为维吾尔药食两用植物鹰嘴豆的生物活性物质基础研究，并开发相应的产品提供了依据。该方法提取、分离过程简单，又不易使多肽失活，制备的多肽抗菌活性高，无毒性、热稳定性好，易于扩大规模生产，降低纯化过程成本，是制备生物活性多肽的理想方法之一。通过该方法获得的多肽作为制备食品、药品添加剂的用途。
1、一种鹰嘴豆中原生抗菌多肽的快速制备方法，其特征在于按下列步骤进行：a、将脱脂鹰嘴豆用液氮冰冻，机械粉碎，过筛10-100目，再用磷酸缓冲液在温度4℃搅拌提取，时间为1-8小时，过滤，将滤液用低温离心机除去沉淀，得到上清液备用；b、将上清液加入无水硫酸氨，充分搅拌溶解后放置冰箱静置24小时，离心，沉淀，将沉淀物采用透析脱盐后，干燥得到粗提多肽，上清液可以用来提取其它的有用多肽；c、将步骤b粗提多肽用重蒸水溶解，用超滤膜过滤，多肽经超滤膜过滤后分为两部分，下层为小分子量多肽，上层为大分子量多肽，将两部分分别低温干燥得到不同分子量范围的多肽，收集下层小分子抗菌多肽；d、再利用常规方法SDS-PAAG确定提取的多肽的分子量，并利用银染色确认所提取分离的多肽纯度，以及对所提取分离的多肽作金黄色葡萄糖球菌的抑制作用来确定其抗菌活性。