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发酵罐如何彻底灭菌
在培养基灭菌之前,通常应先将与罐相连的分空气过滤器用蒸汽灭菌并用空气吹干。实罐灭菌时,先将输料管路内的污水放掉冲净,然后将配制好的培养基泵送至发酵罐(种子罐或料罐)内,同时开动搅拌器进行灭菌。灭菌前先将各排气阀打开,将蒸汽引入夹套或蛇管进行预热,待罐温升至80~90℃,将排气阀逐渐关小。接着将蒸汽从进气口、排料口、取样口直接通入罐中(如有冲视罐也同时进汽),使罐温上升到118~120℃,罐压维持在0.09~0.1Mpa(表压),并保持30min左右。各路进气要畅通,防止短路逆流,罐内液体翻动要激烈;各路排汽也要畅通,但排汽量不宜过大,以节约用气量。
在保温阶段,凡进口在培养基液面以下的各管道及冲视镜管都应进汽;凡开口在液面之上者均应排汽。无论与罐连通的管路如何配制,在实消时均应遵循“不进则出”的原则。这样才能保证灭菌彻底,不留死角。保温结束后,依次关闭各排汽、进汽阀门,待罐内压力低于空气压力后,向罐内通入无菌空气,在夹套或蛇管中通冷却水降温,使培养基的温度降到所需的温度,进行下一步的发酵和培养。在引入无菌空气前,应注意罐压必须低于过滤器压力,否则物料将倒流入过滤器内,后果严重!灭菌时,总蒸汽管道压力要求不低于0.3~0.35Mpa,使用压力不低于0.2Mpa。
空罐灭菌(空消)即发酵罐罐体的灭菌。空消时一般维持罐0.15~0.2Mpa,罐温125~130℃,保持30~45min;要求总蒸汽压力不低于0.3~0.35Mpa,使用汽压不低于0.25~0.3MPa。
发酵罐染菌为什么发酵时间会变长
发酵罐,通常是指工业上用来进行微生物发酵的装置。发酵罐的结构:罐体,主要用来培养发酵各种菌体,密封性要好(防止菌体被污染);罐体当中有搅拌浆,用于发酵 过程当中不停的搅拌;底部通气的Sparger,用来通入菌体生长所需要的空气或氧气;罐体的顶盘上有控制传感器, 常用的有pH电极和DO电极,用来监测发酵过程中发酵液pH和DO的变化控制器,用来显示和控制发酵条件等。
发酵罐使用前必须注意几点:罐体灭菌前务必检查其中液面高度,要求所有的电极都没于液面以下;打开发酵罐电源 前务必检查冷却水是否已打开,温度探头是否已插入槽中,否则会烧坏加热电路;发酵过程中一定要保持工作台的清 洁,用过的培养瓶及其它物品及时清理,因故溅出的酸碱液或水应立即擦干;对罐体安装,拆卸和灭菌时要特别小心 pH电极和罐体的易损又昂贵部件。发酵罐广泛应用于乳制品、饮料、生物工程、制药、精细化工等行业。
发酵产物是某一种微生物或几种微生物在培养基中培养时产生的,如果在发酵时夹杂有其他微生物,可引起下列的后 果:
1、产生菌和杂菌同时在培养基中生长,结果使生产菌丧失了生产能力;杂菌的生长速度有时会比产生菌生长得更快, 结果使发酵罐中以杂菌为主了
2、杂菌会污染终产品,如生产单细胞蛋白质时,从发酵液中分离出的细胞夹杂有杂菌;
3、杂菌本身和其所产生的物质,都可以使产物提取难度加大;
4、杂菌降解所需要的产物。如抗i生素发酵时,污染细i菌,有些细i菌对抗i生素有抗性,固态发酵罐,常见的抗性机制是降解抗i生素。如能产生β-内酰胺酶的细i菌能降解β-内酰胺类抗i生素。
5、发酵时如污染嗜菌体,可使产生菌发生溶菌现象。染菌的危害因不同发酵而不同。
发酵罐配置通气装置的意义是什么?
机械搅拌发酵罐的利用机械搅拌器的作用,使空气和发酵液充分混合,促使氧在发酵液中溶解,以保证供给微生物生长繁殖、发酵所需的氧气。又称通用式发酵罐。发酵设备中重要、应用广的设备,是发酵工业的心脏,是连接原料和产物的桥梁
通气装置是指将无菌空气导入培养基中的装置,简单的通气装置是一单孔管,单孔管的出口位于罐的中央,开口向下,以免培养基中固体物质在开口处堆积和罐底固形物质沉淀。有人曾建议采用多孔环管作为发酵罐的通气装置,但由于发酵过程通气量较大气泡直径与通气量和搅拌有关,山分布器的孔径关系,在强烈搅拌下,实验证明多孔分布器对氧的传递效果并不比单孔管为好,相反还会造成不必要的压力损失及小孔堵塞的麻烦,故不宜采用。
物料从顶部加料孔进入,然后进行蒸煮、灭菌,物料降温通过内蛇管、外夹套冷却,罐底进入无菌空气,从罐顶排出,达到通气、恒温要求, 采用轴向搅拌翻料,发酵罐容积范围为0 .5~10m3。另一种华东理工大学的智能生物发酵罐全容量为50L~5000L, 采用外罐体转动的搅拌方式,物料在罐体内边翻滚边进行蒸汽灭菌,通过进气调节罐内温度和湿度,转速为0~30rmp ,均为不锈钢结构。用这类固态发酵罐来改革我们传统的麸曲制备工艺,成功的希望应该是很大的。
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