不带胶圈螺口锁紧冷冻管

厂商 :苏州陶迈森科学仪器有限公司

江苏 苏州
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商品详细描述

我们现提供的冻存管,为第二代菌之种。菌之种传代前应准备好适于该菌之种生长的液体、固体培养基和培养设备,所有操作均应在符合生物安全保护及无菌条件下进行。取一支冻存管于室温下自然解冻,取适量接种于液体培养基,或划线接种于固体培养基中按规定培养、传代。注意:已经解冻的冻存管应在24 小时内使用,不能再冷冻保存,以免冻融!







(2)去上清液,加入含20%小牛血l清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无面的DMSO或甘油,东营冷冻管,用吸管轻吹打使细胞均匀,10ml冷冻管,细胞浓度为3106~10/ml之间。(3)将上述细胞分装于安藏或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5ml在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,塑料冷冻管,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。



2)离心洗涤:向培养瓶内加5~10m1预冷的MEM使细胞悬浮,再将其吸出置灭菌离心管中,以1000rpm 离心8~10分钟后弃去上清液。

3)细胞悬液的制备:向离心管内逐滴缓慢加入预冷的冻存保护液,使细胞浓度为150~400万/ml,然后迅速分装于安瓿瓶中,每瓶加量为1ml。 

4)致冷冻:将安瓿瓶放入带有棉垫的纸盒或塑料盒内,直立置不同条件下致冷冻保存:a. 4℃两小时后移至-20℃作用2小时,螺口冷冻管,再移入-40℃4小时后在-70℃下24小时投入液氮。b. -20℃4小时后移至-40℃,经4小时移人-70℃冰箱24小时,投入液氮。c. -40℃4小时后移入-70℃24小时后投入液氮。d. -20℃4小时后移入-70℃经24小时后投入液氮中。





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