琼脂糖水平电泳槽批发

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蛋白电泳

蛋白电泳

我们通常把“蛋白电泳”俗称为跑胶,琼脂糖水平电泳槽厂商,如果按照这个字面意思来理解的话就是把蛋白质放在胶上跑,为啥要让蛋白质在胶上跑呢?我们提到的蛋白是总蛋白,也就是说细胞里所有(理论上)蛋白都在里头了,但是我们要检测的只是其中的一两种,所以我们得想办法把各种蛋白质分离开,借助的方法就是跑胶。与核酸电泳一样,蛋白质电泳也需要marker和loading buffer。与核酸电泳不一样的是,蛋白电泳(做WB时)的marker本身就是带有颜色的,在电泳过程中,我们可以清楚地看到marker上的每一个条带的位置,而核酸电泳的过程中我们是看不到marker的每一条带的,只有把胶经过核酸染料染色后,并且在紫外光下我们才能看到marker的条带。

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核酸电泳

               核酸电泳凝胶的制备和电泳步骤

操作方法如下:

(1) 根据所需要的凝胶的大小将相应的凝胶托盘按正确位置放置在制胶器内;

(2) 称取适量琼脂糖,置电泳缓冲液中,加热使琼脂糖溶解;

(3) 待溶液冷至60℃,加入10mg/ml EB贮存液,使终浓度达0.5mg/ml;

(4) 在距离胶模底板0.5-1mm处放置电泳梳,将琼脂糖溶液倒入胶模中,厚度约3-5mm,注意避免产生气泡;

(5) 凝胶完全凝固后,移去梳子和透明胶,将凝胶放入电泳槽。加入TBE缓冲液使恰好没过胶面约1mm;

(6) 将DNA样品与1/6体积加样缓冲液混合后,加入样品槽中;

(7) 接通电源,使样品槽在负极端,用1-5v/cm的电压,琼脂糖水平电泳槽,电泳适当时间;

(8) 电泳结束后,可将含EB的凝胶直接放在紫外线检测仪上观察,并拍照记录,也可将不含EB的凝胶在0.5μg/ml的EB溶液中染色30-45分钟,再如上观察和拍照,记录结果。



那么哪些地方可能会导致漏胶或者漏液这种问题呢?

1. 玻璃板侧方或下方不小心因磕碰受损,这样玻璃板受损处则不再平整,液体会从这些部位漏出。这种情况下只能更换玻璃板,而很多垂直槽的玻璃板和边条压片是粘在一起的,这种情况则需要一起更换。

有时由于清洗不到位,边条压片表面会有污物凸起,也会导致两侧不能密闭夹紧而漏胶。

2. 两侧的夹扣变松,或有些厂家的夹扣为了防止漏液,设计的很紧,琼脂糖水平电泳槽哪家好,时间长之后,玻璃板被挤压变形,密封性下降。这样玻璃板也会从两侧漏胶。

3. 底座的胶垫老化、变形或错位,玻璃板底部会发生漏胶。

4. 桌面不平整,玻璃板上夹具时不容易放正,玻璃板安装到夹具上时是相对于底座橡胶垫倾斜的,这样玻璃板底部会发生漏胶。

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