冷冻食品加工厂非洲猪瘟病毒检测

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非洲猪瘟（African Swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（African Swine fever virus，ASFV）感i染家猪和各种野猪（非洲野猪、欧洲野猪等）引起一种急性、出i血性、烈性传i染病。世界动物卫生组织（OIE）将其列为法定报告动物疫病，该病也是我国防范的一类动物疫情。其特征是发病过程短，最急性和急性i感i染死i亡率高达100%，临床表现为发热（达40~42℃），心跳加快，呼吸困难，部分咳嗽，眼、鼻有浆液性或粘液性脓性分泌物，皮肤发绀，淋巴i结、肾、胃肠粘膜明显出血，非洲猪瘟临床症状与猪瘟症状相似，只能依靠实验室监测确诊。

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非洲猪瘟是一种传i染性强，危害严重的猪感i染病毒性疾病。非洲猪瘟病毒（ASFV）通过直接或间接接触传播，在猪群众传播速度极快。而且，该病毒在未经烹饪的生猪相关制品中存活时间很长，这一特点使得非洲猪瘟容易向未感i染区域传播。由于非洲猪瘟可以感i染野猪，而软蜱通过叮咬野猪成为非洲猪瘟主要传播途径之一，这也给非洲猪瘟的净化带来难度。非洲猪瘟的感i染致死率极高，接近100%，并且目前没有有效的疫i苗和治i疗手段。PCR技术在传i染病诊断上具有广泛的应用，该技术灵敏度高，特异性强，能够在猪、猪产品及环境中病毒的“踪迹”进行有效的监控，是农业农村部指i定的非洲猪瘟首i选诊断技术。

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根据动物防疫法及其配套规章规定，县级动物卫生监督机构依法向屠宰场派驻(出)官i方兽医实施屠宰检疫。按照生猪屠宰检疫规程和相关规定，屠宰检疫内容包括传i染病和寄i生虫病，检疫流程包括生猪进入屠宰厂(场、点)监督查验、检疫申报、宰前检查、同步检疫、检疫结果处理以及检疫记录等。在非洲猪瘟防控期间，官i方兽医监督屠宰企业开展非洲猪瘟自检，对没有开展自检的屠宰企业，对屠宰后的生猪产品一律不得出具动物检疫证明。

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实时荧光定量PCR(real-time quantitativePCR)/QRT-PCR，是指在PCR反应体系中加入荧光标记物，冷冻食品加工厂非洲猪瘟病毒检测，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法。一般用于mRNA转录水平的定量研究、不同样本或基因组中DNA拷贝数的测定、基因芯片结果验证、药i效分析等。金开瑞采用SYBR荧光染料法及TaqMan探针法进行荧光定量PCR检测，从引物设计到检测一次性完成，提供2种常用的内参引物及免费的专业数据分析，每个样品设置至少三个平行对照，保证结果的准确可靠。

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非洲猪瘟为何难以控制？非洲猪瘟病毒基因组全长 170～190 kb，为有囊膜的双链 DNA 病毒，病毒粒子大小为 175～215 nm，呈正二十面体结构，也是唯i一的虫媒DNA病毒。非洲猪瘟病毒是一种急性、热性、高度接触性传i染病，引起猪的死i亡率可达100％，并且非洲猪瘟具有潜伏期，即使感i染病毒，但没有临床症状，就有可能通过非实验室检验技术关卡流入市场，进而导致下游食品企业相关问题的出现。

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非洲猪瘟与传统猪瘟相似且综合症状复杂难辨，临床上类似于急性猪瘟，表现为高热、皮肤充血、流i产、水肿和脏器出血。我国因之前不属于非洲猪瘟i疫情国家，因此没有相关的针对性研究，目前采用的是原农i业部检疫所于1997年与美国梅岛动物病研究所共同研究的检测方法，主要是PCR和ELISA，标准遵循GB/T 18648-2002非洲猪瘟诊断技术。随着相关检测技术的发展，对于非洲猪瘟的检测方法也更加完善。PCR技术是目前最i简单、快速的分子学检测方法，但该方法的敏感性有限，因此以PCR为基础的更新方法应运而生。

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