核酸提取纯化销售

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非洲猪瘟为何难以控制？非洲猪瘟病毒基因组全长 170～190 kb，为有囊膜的双链 DNA 病毒，病毒粒子大小为 175～215 nm，呈正二十面体结构，也是唯i一的虫媒DNA病毒。非洲猪瘟病毒是一种急性、热性、高度接触性传i染病，引起猪的死i亡率可达100％，并且非洲猪瘟具有潜伏期，即使感i染病毒，但没有临床症状，就有可能通过非实验室检验技术关卡流入市场，进而导致下游食品企业相关问题的出现。

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非洲猪瘟与传统猪瘟相似且综合症状复杂难辨，临床上类似于急性猪瘟，表现为高热、皮肤充血、流i产、水肿和脏器出血。我国因之前不属于非洲猪瘟i疫情国家，因此没有相关的针对性研究，目前采用的是原农i业部检疫所于1997年与美国梅岛动物病研究所共同研究的检测方法，主要是PCR和ELISA，标准遵循GB/T 18648-2002非洲猪瘟诊断技术。随着相关检测技术的发展，对于非洲猪瘟的检测方法也更加完善。PCR技术是目前最i简单、快速的分子学检测方法，但该方法的敏感性有限，因此以PCR为基础的更新方法应运而生。

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在real-time Q-PCR技术中，无论是相对定量还是标准曲线定量方法仍存在一些PCR定量方法均有的问题有待解决。在标准曲线定量中，标准品的制备是一个必不可少的过程。目前由于无一统一标准，各个实验室所用的生成标准曲线的样品各不相同，致使实验结果缺乏可比性。此外，用real-time Q-PCR来研究mRNA时，核酸提取纯化销售，受到不同RNA样本存在不同的逆转录（RT）效率的限制。在相对定量中，其前提是假设内源控制物不受实验条件的影响的，合理地选择合适的不受实验条件影响的内源控制物也是实验结果可靠与否的关键。

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与传统的PCR技术相比，Real-time Q-PCR的不足之处是：（1）由于运用了封闭的检测，减少了扩增后电泳的检测步骤，因此也就不能监测扩增产物的大小；（2）因为荧光素种类以及检测光源的局限性，从而相对地限制了real-time Q-PCR的复合式（multiplex）检测的应用能力；（3）目前real-time Q-PCR实验成本比较高，从而也限制了其广泛的应用。

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根据动物防疫法及其配套规章规定，县级动物卫生监督机构依法向屠宰场派驻(出)官i方兽医实施屠宰检疫。按照生猪屠宰检疫规程和相关规定，屠宰检疫内容包括传i染病和寄i生虫病，检疫流程包括生猪进入屠宰厂(场、点)监督查验、检疫申报、宰前检查、同步检疫、检疫结果处理以及检疫记录等。在非洲猪瘟防控期间，官i方兽医监督屠宰企业开展非洲猪瘟自检，对没有开展自检的屠宰企业，对屠宰后的生猪产品一律不得出具动物检疫证明。

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实时荧光定量PCR(real-time quantitativePCR)/QRT-PCR，是指在PCR反应体系中加入荧光标记物，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法。一般用于mRNA转录水平的定量研究、不同样本或基因组中DNA拷贝数的测定、基因芯片结果验证、药i效分析等。金开瑞采用SYBR荧光染料法及TaqMan探针法进行荧光定量PCR检测，从引物设计到检测一次性完成，提供2种常用的内参引物及免费的专业数据分析，每个样品设置至少三个平行对照，保证结果的准确可靠。

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