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PCR仪即基因扩增仪,主要是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。根据DNA扩增的目的和检测的标准可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR,实时荧光定量PCR仪四大类。下面就来为大家一一介绍:
1.普通PCR仪
普通PCR仪是一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度,如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行,主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。
2.梯度PCR仪
梯度PCR仪是一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样既节约时间,也节约经费。在不设置梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。
3.原位PCR仪
原位PCR仪是用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪。可保持细胞或组织的完整性,PCR仪厂家,使PCR反应体系渗透到组织和细胞中,普通PCR仪,在细胞的靶DNA所在的位置进行基因扩增。对于分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有着重大的实用价值。
4.实时荧光定量PCR仪
荧光定量PCR是在普通PCR仪基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。主要应用于临床医学检测、食品行业、科研院校等。
PCR仪也叫基因扩增仪,它是利用PCR技术对特定基因做体外的大量合成,用于以检测DNA/RNA为目的的各种基因分析。
PCR技术原理
该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下,依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA来启动合成,通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合,形成部分双链。在适宜的温度和环境下,DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3′-OH末端,并以此为起始点,沿模板5′→3′方向延伸,PCR仪,合成一条新的DNA互补链。
PCR反应步骤
分别是1.变性,梯度PCR仪,2.引物退火,3.引物延伸。 所谓变性是将DNA加热至90-95℃变性,将双链DNA加热后转为单链DNA做为复制的模板. 而引物退火则是引物于一定的温度下(冷却至55-60℃)附着于模板DNA两端。 最后在DNA聚合酶的作用下(加热至70-75℃)进行引物的延伸及另一链的合成。
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